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更新时间:2024-11-04
小鼠胚胎肝母细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胚胎;肝脏 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7651 |
细胞简介:
小鼠胚胎肝母分离自胚胎肝组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏起源于腹侧前肠内胚层细胞(一种多潜能干细胞)。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,前肠的原始上皮细胞接触心肌中胚层后快速增殖,形成肝原基。大约1d后,原始上皮细胞侵入原始横膈,继续分化为幼稚肝脏上皮细胞,这些细胞先表达 AFP 然后是ALb。幼稚肝脏上皮细胞很快成熟,并进一步分化为肝细胞或胆管上皮细胞,因为此期的肝脏上皮细胞其具有向这两种肝实质细胞双向分化的潜能,所以又称肝母细胞。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠胚胎肝母采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠胚胎肝母经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
血管活性肠肽 (VIP) 作用: ELISA 规格: 进口分装
内脂素 / 内脏脂肪素 (Visfatin) 作用: ELISA 规格: 进口分装
软骨糖蛋白 39(YKL-40) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠血管紧张素转化酶(mouse ACE) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠乙型肝表面抗体(HBsAb)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human soluble cluster of differeiation 28 (sCD28) ELISA Kit 人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)试剂盒
Humanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit 人谷脱羧酶(GAD)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Rabbit6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit兔6同前列腺素F1a
饮料L-苹果酸比色法定量试剂盒20次
MousemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/H-2ⅠELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)试剂盒规格:96T/48T
HRAS样抑制因子3抗体
DPY19L2蛋白抗体
BTLA重组小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 标签) Protein
防御素β131(DEFβ131)重组蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)
CD33重组人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 标签) Protein
CCL8 Protein Human 重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签)
CD3D Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白
防御素β131(DEFβ131)重组蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)
CCL8 Protein Human 重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签)
BTLA重组小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD3D Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白
CD33重组人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 标签) Protein
小鼠胚胎肝母细胞大鼠钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶(CaMKK)试剂盒 ,英文名: CaMKK ELISA Kit
Porcine low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 猪低分子肝素(LMWH)试剂盒
转基因植物Bar基因核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMCP-1/CCL2/MCAF(Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor)ELISAkit人单核细胞趋化蛋白1
体液血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)总活性荧光定量试剂盒20次
ELISAKitWGA麦胚凝集素/凝集蛋白
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行