小鼠脑静脉血管平滑肌细胞

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更新时间：2024-11-04

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产品名称：小鼠脑静脉血管平滑肌细胞

组织来源：脑静脉组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞简介：

小鼠脑静脉血管平滑肌分离自脑静脉组织；与脑动脉相比，脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同，脑静脉管壁中没有静脉瓣，静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为：大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉；小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛，进入静脉导血管再到头皮，最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛，即使两侧颈内静脉都被阻塞，大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠脑静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠脑静脉血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品：

小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒   96T/48T

小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)试剂盒   96T/48T

小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)试剂盒   96T/48T

小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)试剂盒   96T/48T

小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睾酮(T)试剂盒

Humanamiodarone,ADELISAKit 人呋酮(AD)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenC-ReactiveProtein,CRP试剂盒鸡C反应蛋白(CRP)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MousehepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISAKit小鼠乙型肝表面抗体(HBsAb)试剂盒规格：96T/48T

FITC标记小鼠CD47单克隆抗体

BCL2样12含脯蛋白抗体

CD38重组人 SCARB3 蛋白 Protein

胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)重组蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)

NA重组甲型流感 H1N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

CD86 Protein Human 重组人 CD86 / B7-2 蛋白

Shiga toxin II subunit B Protein E. coli 重组肠出血性大肠杆菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白

胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)重组蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)

CD86 Protein Human 重组人 CD86 / B7-2 蛋白

CD38重组人 SCARB3 蛋白 Protein

Shiga toxin II subunit B Protein E. coli 重组肠出血性大肠杆菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白

NA重组甲型流感 H1N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

小鼠脑静脉血管平滑肌细胞大鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH)试剂盒 ，英文名： GAPDH ELISA Kit

Pig superoxide dismase (SOD) ELISA Kit 猪超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒

流行性腮腺病毒(MV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforM-CSF(MouseMacrophageColony-StimulatingFactor)ELISAKit小鼠巨噬细胞集落刺激因子

体液氏菌(SalmonellaTyphi)定性试剂盒20次

ELISAKitMHC绵羊主要组织相容性复合体

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作