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更新时间:2024-11-04
小鼠角膜上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
眼角膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7386 |
细胞简介:
小鼠角膜上皮分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下:①角膜是的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞;②角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统;③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠角膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠角膜上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
猪乙型脑病毒试剂盒 猪乙型脑病毒试剂盒 规格型号:96T/48T 猪乙型脑病毒试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:猪乙型脑病毒试剂盒、猪乙型脑病毒eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
猪乙酰受体抗体试剂盒 猪乙酰受体抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 猪乙酰受体抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:猪乙酰受体抗体试剂盒、猪乙酰受体抗体eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
猪乙酰试剂盒 猪乙酰试剂盒 规格型号:96T/48T 猪乙酰试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:猪乙酰试剂盒、猪乙酰eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒 规格型号:96T/48T 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒、猪主要组织相容性复合体Ⅲ类eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
猪血清淀粉样蛋白A(SAA)试剂盒
Human myosin light chain kinase (MLCK) ELISA Kit 人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)试剂盒
RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit 兔子白介素9(IL-9)试剂盒 进口分装
CLIAKitforai-RV(Humanai-rabiesvirusaibody)ELISAKit人抗狂犬病毒抗体
血液3-羟-3-甲戊二酰(HMG-COA)合成酶活性比色法定量试剂盒20次
Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)试剂盒
ARF鸟苷酸交换因子BIG1抗体
组织相容性抗原DP抗体
TF重组小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白 Protein
干扰素诱导内质网关联病毒抑制蛋白(Viperin)重组蛋白 Recombinant Virus Inhibitory Protein (Viperin)
MAPK12重组人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 (His & GST 标签) Protein
BLMH Protein Human 重组人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 标签)
FCGR2A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His 标签)
X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)重组蛋白 Recombinant X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6)
BLMH Protein Human 重组人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 标签)
PARP1重组小鼠 PARP-1 / PARP 蛋白 (His 标签) Protein
HFE2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 蛋白 (His 标签)
FUCA1重组人 FUCA1 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠角膜上皮细胞大鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)试剂盒 ,英文名: HMGB1 ELISA Kit
Rabbit laminin / laminin (LN) ELISA Kit 兔子层连蛋白/板层素(LN)试剂盒
基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMHCII/AgBII/H-1IIELISAKit大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类
体液离子(Na)浓度化学比色法定量试剂盒20次
ELISAKitNP-Y牛神经肽Y
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行