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基础信息Product information
产品名称：
小鼠角膜内皮细胞
产品简介：
小鼠角膜内皮细胞公司正在出售的产品：MEX3A蛋白抗体 GATM蛋白抗体 TOX4蛋白抗体 小鼠淋巴管内皮细胞 大鼠胎盘间充质干细胞 CAL 33人舌鳞状细胞癌 PLC/PRF/5人肝癌细胞
产品型号：
厂商性质：经销商
访问量：13
更新时间：2024-11-04
产品特性Product characteristics
小鼠角膜内皮细胞
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
眼角膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7543 |
细胞简介：
小鼠角膜内皮分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一，而角膜内皮细胞（CEC）在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞，构成了后弹力层和房水之间的物理屏障，通过离子“泵"功能调节角膜中离子浓度和水分，维持角膜的半脱水状态，保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱，常导致角膜水肿而使角膜部分甚至失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有：①角膜是的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能；②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用；③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性，维持角膜和房水内Na+梯度，防止水分渗入角膜内，维持角膜实质层相对脱水状态，维持透明性。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠角膜内皮采用混合胶原酶消化结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠角膜内皮经NSE（神经元特异性烯醇化酶）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
乙脱氢酶（ALDH）试剂盒 紫外分光光度法 50管/48样
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样
NADP0酸酶（NADPase）测试盒 可见分光光度法 50管/48样
6-0酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样
鸭子免疫球蛋白G(IgG)ELISA 试剂盒
Human ininsic factor aibody (IFA) ELISA Kit 人抗内因子抗体(IFA)试剂盒
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)试剂盒 进口分装
CLIAKitforADA(Humanadenosinedeaminase)ELISAKit人腺苷脱氨酶
血液总酶连续循环荧光定量试剂盒20次
MouseProstaticAcidPhosphatase,PAPELISAKit小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)试剂盒
APC标记人CD79b单克隆抗体
组蛋白乙酰转移酶B蛋白4抗体
OPCML重组人 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 标签) Protein
微粒体S转移酶1(MGST1)重组蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)
KIRREL重组人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 标签) Protein
CADM1 Protein Human 重组人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 标签)
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
微粒体S转移酶1(MGST1)重组蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)
CADM1 Protein Human 重组人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 标签)
OPCML重组人 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 标签) Protein
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
KIRREL重组人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠角膜内皮细胞大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)试剂盒 ，英文名： HMGB-1 ELISA Kit
Rabbit compleme fragme 3A (C3a) ELISA Kit 兔子补体片断3a(C3a)试剂盒
空肠弯曲菌(CJ)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMHC-II/H-2II(Mousemajorhistocompatibilitycomplex-II)ELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类
体液内毒素浊度法定量试剂盒20次
ELISAKitEPI牛
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
