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更新时间:2024-11-04
小鼠虹膜色素上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
眼球 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7380 |
细胞简介:
小鼠虹膜色素上皮分离自眼球虹膜组织;虹膜是眼睛构造的一部分,属于眼球中层,位于血管膜的最前部;在睫状体前方虹膜,中心有一圆形开口,称为瞳孔,犹如相机当中可调整大小的光圈,内含色素决定眼睛的颜色。日间光线较为强烈时,虹膜会收蹜,只使一小束光线穿透瞳孔,进入眼睛;当进入黑暗环境中,虹膜就会往后退缩,使瞳孔变大,让更多的光线进入眼睛,多数的脊椎动物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮细胞(IPE)是虹膜重要结构组成细胞之一,位于虹膜组织的后面,和视网膜色素上皮细胞(RPE)同样起源于神经外胚叶层,可能具有相似的生物学功能,因此对IPE的研究将为防治因RPE结构或功能异常而导致的眼底病提供新思路。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠虹膜色素上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠虹膜色素上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
猪总蛋白(TPS)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA 试剂盒
Human activated Hageman factor (F XII a) ELISA Kit 人活化Ⅻ(FⅫa)试剂盒
RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 兔载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒 进口分装
CLIAKitforANX-VELISAKit大鼠膜联蛋白Ⅴ
血小板活化因子乙酰水解酶(PAFAH)活性比色法定量试剂盒20次
PorcineIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit猪白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒
4号染色体开放阅读框44抗体
肿瘤抑制基因野生型P53单克隆抗体
MBL1重组大鼠 MBL1 蛋白 Protein
DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 标签DYKDDDDK Tag分支肽
GOLM1重组人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 标签) Protein
BMPR1B Protein Human 重组人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 标签)
THSD1 Protein Mouse 重组小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 标签)
DYKDDDDK Tag(CT 0.5mgDYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 标签DYKDDDDK Tag分支肽
BMPR1B Protein Human 重组人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 标签)
MBL1重组大鼠 MBL1 蛋白 Protein
THSD1 Protein Mouse 重组小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 (His 标签)
GOLM1重组人 GOLM1 / GP73 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠虹膜色素上皮细胞大鼠骨保护素(OPG)试剂盒 ,英文名: OPG ELISA Kit
Rabbit ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 兔子白介素2(IL-2)试剂盒
人细小病毒(B19)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMIP-3Beta/ELC/CCL19(Mousemacrophageinflammatoryprotein3Beta)ELISAKit小鼠巨噬细胞性蛋白3β
体液结构型神经元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量试剂盒20次
ELISAKitIL-6犬白介素6