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更新时间:2024-11-04
小鼠海绵体内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
海绵体组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7528 |
细胞简介:
小鼠海绵体内皮分离自海绵体组织;阴茎海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构,它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面,仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大,平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来,从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此,比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠海绵体内皮采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠海绵体内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
转基因植物NOS基因核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
转基因植物NOS基因核酸试剂盒 48T
转基因植物PAT基因核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
转基因植物PAT基因核酸试剂盒 48T
猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒
Human leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 人黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒
Rabbitniicoxidesyhase,NOSELISAKit 兔合成酶(NOS)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAP(HumanAprotinin)ELISAKit人
血清样品液相法去内毒素试剂盒20次
PorcineIerleukin12,IL-12/P40ELISAKit猪白介素12(IL-12/P40)试剂盒
20号染色体开放阅读框202抗体
中性粒细胞弹性蛋白酶ELANE抗体
NRP1重组食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原
GRK6重组人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 标签) Protein
BPHL Protein Human 重组人 BPHL 蛋白 (His 标签)
MCAM Protein Mouse 重组小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 标签)
IL-23(Interleukin-23 0.5mgIL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原
BPHL Protein Human 重组人 BPHL 蛋白 (His 标签)
NRP1重组食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
MCAM Protein Mouse 重组小鼠 CD146 / MCAM 蛋白 (His 标签)
GRK6重组人 GRK6 / GPRK6 蛋白 (His & GST 标签) Protein
小鼠海绵体内皮细胞大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)试剂盒 ,英文名: BMP-3 ELISA Kit
Rabbit ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 兔子白介素1β (IL-1β)试剂盒
3型脊髓灰质病毒(PV-3)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMIS/AMH(HumanMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone)ELISAKit人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素
体液碱性0酸酶活性比色法定量试剂盒20次
ELISAKitE2犬雌二醇
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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