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更新时间:2024-11-04
小鼠骨髓基质细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨髓 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7108 |
细胞简介:
小鼠骨髓基质分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质细胞是一类具有多向分化潜能的干细胞,其中部分细胞有自我复制、高度增殖和多向分化能力,在特定培养条件下可向骨、软骨、神经胶质细胞、心肌、骨胳肌、脂肪细胞、血管内皮细胞等间叶组织细胞转化。骨髓基质细胞在自然条件下主要分化为成骨细胞,在不同的培养条件下其分化途径不同,其在成骨细胞与成脂细胞分化之间呈反向变化。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠骨髓基质采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠骨髓基质经CD29、CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠细胞色素P450(mouse Cytochrome P450) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠C反应蛋白(mouse CRP) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠CXC趋化因子受体3(mouse CXCR3) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠CXC趋化因子配体16(mouse CXCL16) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠(VE)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat CrossLaps ELISA Kit (Cr) 大鼠骨胶原交联(Cr)试剂盒
Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人脱轻酶(SDH)试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenIerleukin6,IL-6试剂盒鸡白介素6(IL-6)试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞IL蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISAKit小鼠糖皮质类固醇受体(GR)试剂盒规格:96T/48T
白介素22受体结合蛋白抗体
有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体
TNFRSF19重组小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19
TXNDC17重组人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein
CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重组人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白
SELP Protein Rat 重组大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19
CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重组人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白
TNFRSF19重组小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
SELP Protein Rat 重组大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白
TXNDC17重组人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein
小鼠骨髓基质细胞大鼠骨形成蛋白6(BMP6)试剂盒 ,英文名: BMP6 ELISA Kit
People aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 人Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)试剂盒
RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforEMAIgA(Humanai-EndomysialAibodyIgA)ELISAKit人抗肌内膜抗体IgA
细胞内核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG流式细胞分析试剂盒10次
RatIerleukin8,IL-8ELISAKit大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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