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更新时间:2024-11-04
小鼠表皮角质形成细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
皮肤组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7322 |
细胞简介:
小鼠表皮角质形成分离自皮肤组织;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞,此类细胞为表皮的主体,由表皮深层始逐渐增殖、分化,并在成为角化的角质细胞中,细胞核与细胞器消失,细胞亦失去生理功能而脱落。未脱落部分对机体尚有保护作用,故不必在洗擦身体时用力搓擦,使其过早脱失。表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层,在上皮程序性死亡后,细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化,不能充分增殖。角质形成细胞最终产生角质蛋白,在其向角质细胞演变过程中,一般可以分为四层,即基底层、棘层、颗粒层以及角质层。有人把前三层或前二层称为生发层或马尔匹基层。此外,在某些部位,特别在掌跖部位,角质层下方还可见到透明层。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠表皮角质形成层细胞先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠表皮角质形成经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
盐酸克伦特罗检测试纸条 Detection of clenberol sip
莱克多巴胺检测试纸条(尿样) Ractopamine test sip (urine)
莱克多巴胺检测试纸条(组织) Ractopamine test sip (Organization)
霉素检测试纸条(液态样品) Chloramphenicol detection test sip (liquid sample)
鸭α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human adrenal coex aibody (AAA) ELISA Kit 人抗肾上腺皮质抗体(AAA)试剂盒
HumanFolicacid,FAELISAKit 人(FA)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAChEELISAKit大鼠乙酰酯酶
药品阿斯巴塘(aspaame)含量薄层色谱法定性试剂盒20次
Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit小鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)试剂盒规格:96T/48T
HRAS样抑制因子2抗体
尾型同源盒转录因子2重组兔单克隆抗体
NXPH1重组大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧诱导因子1β 抗原
PLA2G7重组人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein
CANX Protein Human 重组人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 标签)
CD300A Protein Mouse 重组小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 标签)
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧诱导因子1β 抗原
CANX Protein Human 重组人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 标签)
NXPH1重组大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein
CD300A Protein Mouse 重组小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 标签)
PLA2G7重组人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein
小鼠表皮角质形成细胞大鼠环0酸鸟苷(cGMP)试剂盒 ,英文名: cGMP ELISA Kit
Rabbit ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 兔抗单核细胞抗体(AMA)试剂盒
登革热病毒通用型(DFV-U)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISAkit小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6
体液还原型(GSH)浓度高效液相色谱定量试剂盒50次
ELISAKitPⅠCP人Ⅰ型前胶原羧基端肽
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行