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更新时间:2024-11-04
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:兔椎间盘髓核细胞
组织来源:椎间盘组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
兔椎间盘髓核分离椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,分为中央部的髓核,富于弹性的胶状物质;周围部的纤维环,由多层纤维软骨环按同心圆排列。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核,是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含水量为80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而松散,位于椎间盘的中央,至成年时位置移至椎间盘的中后部;在成年以前构成髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨,随着年龄的增长,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐渐减少,胶原增粗并逐渐被纤维软骨所替代。
方法简介:
公司实验室分离的兔椎间盘髓核采用胶原酶-混合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔椎间盘髓核经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
乙酰转移酶 英文名称: Rat acetylansferase 规格: 英文缩写: ChAT
大鼠降钙素 英文名称: calcitonin 规格: 英文缩写: CAL
大鼠环0酸腺苷 英文名称: cyclic adenosine monophosphate 规格: 英文缩写: CAMP
大鼠环0酸鸟苷 英文名称: Cyclic guanosine monophosphate 规格: 英文缩写: cGMP
羊表皮生长因子(EGF)ELISA 试剂盒
Human ai epidemic hemorrhagic fever virus IgM aibody (EHF) ELISA Kit 人抗流行性出血热病毒抗体IgM (EHF)试剂盒
Humanacetylcholine,ACHELISAKit 人乙酰(ACH)试剂盒 进口分装
CLIAKitforADAM8(MouseADisiegrinAndMetalloprotease8)ELISAKIT小鼠解整合素样金属蛋白酶8
血液脂蛋白相关0脂酶A2(LPPLA2)活性比色法定量试剂盒20次
Mousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)试剂盒
FbxW2蛋白抗体
死亡相关转录因子1抗体
FKBP1A重组小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 标签) Protein
Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)
PTPRJ重组人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 标签) Protein
CA5B Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 标签)
CDH1 Protein Rat 重组大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白
Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)
CA5B Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 标签)
FKBP1A重组小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 标签) Protein
CDH1 Protein Rat 重组大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白
PTPRJ重组人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 标签) Protein
兔椎间盘髓核细胞大鼠活化素B(ACV-B)试剂盒 ,英文名: ACV-B ELISA Kit
Rabbit cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA Kit 兔半胱蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)试剂盒
杆菌(BA)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化调节趋化因子
体液元素比色法定量试剂盒20次
ELISAKitColⅣ人Ⅳ型胶原
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