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基础信息Product information
产品名称：
兔血管外膜成纤维细胞
产品简介：
兔血管外膜成纤维细胞公司正在出售的产品：脂肪分解刺激脂蛋白受体抗体 Prader-Willi综合征相关蛋白抗体 分选连接蛋白4抗体 兔胰腺星状细胞 人肝窦内皮细胞 NCI-H1048人小细胞肺癌细胞 HCT-8 [HRT-18] (人回盲肠癌细胞)
产品型号：
厂商性质：经销商
访问量：20
更新时间：2024-11-04
产品特性Product characteristics
兔血管外膜成纤维细胞
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
血管组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7110 |
细胞简介：
兔血管外膜成纤维分离自血管外膜组织；血管外膜是由疏松结缔组织组成，其中含螺旋状或纵向分布的弹性纤维和胶原纤维。血管壁的结缔组织细胞以成纤维细胞为主，当血管受损伤时，成纤维细胞具有修复外膜的能力。有的动脉中膜和外膜的交界处，有密集的弹性纤维组成的外弹性膜。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的血管外膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。血管外膜成纤维细胞是血管外膜的主要组成细胞之一，其主要生理功能合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介：
公司实验室分离的兔血管外膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的兔血管外膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
兔子上腺髓质素(ADM)试剂盒 96T/48T
兔子神经营养因子4(-4)试剂盒 96T/48T
兔子神经营养因子3(-3)试剂盒 96T/48T
兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)试剂盒 96T/48T
小鼠白三烯E4(LTE4)试剂盒 96T/48T
Rat heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 大鼠热休克蛋白40(HSP-40)试剂盒
HumanSeptokinase,SKELISAKit 人链激酶(SK)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3试剂盒人美丽线虫凋亡基因(CED-3)试剂盒规格：96T/48T
质粒/蛋白制备样品内毒素浊度法定量试剂盒20次
HumansolubleP-selectin，sP-selectinELISAKit人可溶性P选择素(sP-selectin)试剂盒规格：96T/48T
CD134抗体
上皮钠通道β抗体
LDLR重组小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
ACOX1重组人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein
GAPDH Protein Human 重组人 GAPDH 蛋白
ICOSLG Protein Mouse 重组小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 标签)
CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
GAPDH Protein Human 重组人 GAPDH 蛋白
LDLR重组小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein
ICOSLG Protein Mouse 重组小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 标签)
ACOX1重组人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein
兔血管外膜成纤维细胞大鼠基质金属蛋白酶13(MMP13)试剂盒 ，英文名： MMP13 ELISA Kit
Mouse cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 小鼠组织蛋白酶K(cath-K)试剂盒
RatvisfatinELISAKit 大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforF1+2(Rabbitprothrombinfragme1+2)ELISAKit兔原片段F1+2
细胞结构型内皮细胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性荧光定量试剂盒20次
Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受体(M-AChR)试剂盒规格：96T/48T
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
