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更新时间:2024-11-04
兔胸腺上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胸腺 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X8100 |
细胞简介:
兔胸腺上皮分离自胸腺组织;胸腺是机体重要的淋巴器官,其功能与免疫紧密相关,是T细胞分化、发育、成熟的场所,还可以分泌胸腺激素及激素类物质,具有内分泌技能的器官。胸腺上皮细胞和胸腺细胞是胸腺微环境的重要组成部分,其外,胸腺上皮细胞组成了胸腺细胞不同发育阶段的三维结构,根据其在胸腺中位置不同,可分为皮质胸腺上皮细胞和髓质胸腺上皮细胞。胸腺细胞的发育和成熟是通过在胸腺皮质和髓质上皮细胞的迁移过程中相互作用完成的。此外,胸腺细胞通过皮质胸腺上皮细胞介导的阳性选择和髓质胸腺上皮细胞介导的阴性选择发育为能够识别和耐受自身主要组织相容复合体和自身抗原的成熟T淋巴细胞。胸腺上皮细胞是构成胸腺微环境的主要成份,其形态、分布和功能多样。表面抗原表达具有高度异质性,与胸腺细胞结合成不同类型复合体,部分胸腺上皮细胞相互排列构成囊泡样结构。电镜观察,可把胸腺上皮细胞分为3-6型,用抗胸腺上皮细胞单克隆抗体荧光染色可把胸腺上皮细胞分为9种类型。
方法简介:
实验室分离的兔胸腺上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔胸腺上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胸腺上皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠α羟基脱氢酶(αHBDH)试剂盒 96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)试剂盒 96T/48T
小鼠αS转移酶(α-GST)试剂盒 96T/48T
小鼠α甘露糖苷酶(αManase)试剂盒 96T/48T
小鼠汉坦病毒(HV)试剂盒 96T/48T
Adrenaline (EPI) ELISA Kit 人(EPI)试剂盒
humanEndothelin1,ET-1ELISAKit 人内皮素1(ET-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody,ai-PIVIgM试剂盒人抗副流感病毒IgM抗体(ai-PIVIgM)试剂盒规格:96T/48T
植物细胞壁钙荧光白(Calcofluorwhite;CFW)荧光染色试剂盒20次
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激酶2(Tie-2)试剂盒规格:96T/48T
B淋巴细胞白血病前体蛋白转录因子4抗体
三磷酸腺苷受体受体P2X3抗体
VTCN1重组小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 标签) Protein
白介素8受体α(IL8Rα)重组蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
IL1R2重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
FABP2 Protein Human 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白
白介素8受体α(IL8Rα)重组蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
FABP2 Protein Human 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白
VTCN1重组小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 标签) Protein
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白
IL1R2重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
兔胸腺上皮细胞大鼠基质金属蛋白酶16(MMP16)试剂盒 ,英文名: MMP16 ELISA Kit
Mouse histone H2b (histon-H2b) ELISA Kit 小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)试剂盒
Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 大鼠原激活肽(TAP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforF1+2(Humanprothrombinfragme1+2)ELISAkit人原片段F1+2
细胞结构型内皮细胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量试剂盒20次
Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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