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更新时间:2024-11-04
兔胎盘间充质干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胎盘 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8134 |
细胞简介:
兔胎盘间充质分离自胎盘组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素,是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。胎盘间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一种多能干细胞,是具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞像APSC多能细胞。在胚胎发育中来源于中胚层。在机体正常的组织损伤修复过程中,MSC是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损伤引起的特殊信号作用下,MSC迁移到受损部位,在局部聚集增殖,依据不同的损伤信号沿着不同途径分化。MSC易于分离扩增,体外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一种实用的组织修复种子细胞。相较于其他干细胞,胎盘间充质干细胞具有来源方便,细胞数量充足,易于分离、培养、扩增和纯化,传代扩增多代后仍具有干细胞特性。胎盘是干细胞的优良来源。
方法简介:
实验室分离的兔胎盘间充质干采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔胎盘间充质干经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态优良
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胎盘间充质干体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠绒毛膜(CG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠二(MDA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit E(IgE)试剂盒
HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit 人水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒 96T/48T 进口分装
Equineamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40试剂盒马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母NAD依赖性甘油-3-0酸脱氢酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光谱法定量试剂盒20次
MouseCrosslaps,CrELISAKit小鼠骨胶原交联(Cr)试剂盒规格:96T/48T
AF647标记的信号转导和转录激活因子5抗体
趋化因子26/嗜酸粒细胞趋化蛋白3抗体
Spike重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 标签) Protein
TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)
IL10RB重组人 IL10Rb 蛋白 Protein
CNPY3 Protein Human 重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签)
NTRK3 Protein Human 重组人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 标签)
TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)
CNPY3 Protein Human 重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签)
Spike重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 标签) Protein
NTRK3 Protein Human 重组人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 标签)
IL10RB重组人 IL10Rb 蛋白 Protein
兔胎盘间充质干细胞大鼠间羟(MN)试剂盒 ,英文名: MN ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 小鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)试剂盒
RatADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFETU-A(HumanFetuinA)ELISAKit人胎球蛋白A
细胞基质金属蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明胶法比色定量试剂盒20次
RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行