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更新时间:2024-11-04
兔输尿管上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
尿道 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X8006 |
细胞简介:
兔输尿管上皮分离自输尿管组织;输尿管上接肾盂,下连膀胱,是一对细长的管道,呈扁圆柱状,位于腹膜后,为一肌肉粘膜所组成管状结构,沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管有三个狭窄部:一个在肾盂与输尿管移行处(输尿管起始处);一个在越过小骨盆入口处;最后一个在进入膀胱壁的内部。这些狭窄是结石及坏死组织容易停留的部位。输尿管——膀胱连接处有一种特殊结构,即瓦耳代尔鞘,它能有效地防止膀胱内尿液返流到输尿管。临床上将输尿管分为上、中、下三段,也可称为腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自肾盂输尿管交界处,到跨越髂动脉处;盆段,自髂动脉到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁内斜行至膀胱粘膜、输尿管开口。输尿管管壁分为4层,黏膜层、固有层、肌层、外膜。黏膜层表面为移行上皮,约有4-5层细胞;固有层由细密的结缔组织构成,内含胶原纤维和少量弹性纤维;输尿管肌层主要由内纵和外环两层平滑肌组成;外膜为疏松结缔组织,营养血管由外膜进入输尿管。其中,输尿管上皮细胞主要分布于黏膜层。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔输尿管上皮采用先消化、然后机械分离法使输尿管分层、最后胶原酶消化,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔输尿管上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔输尿管上皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
乳铁蛋白( Lactoferrin ) 作用: ELISA 规格: 进口分装
白血病抑制因子 (LIF) 作用: ELISA 规格: 进口分装
脂蛋脂酶 A2(LP-PLA2) 作用: ELISA 规格: 进口分装
脂肪细胞刺激因子 (LSP) 作用: ELISA 规格: 进口分装
豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat androgen (androgen) ELISA Kit 大鼠雄激素(androgen)试剂盒
Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISAKit 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1AbIgG)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCX3C-chemokinereceptor1,CX3CR1试剂盒人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)试剂盒规格:96T/48T
组织ERK1/2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit人孕同受体(PGR)试剂盒规格:96T/48T
ADP核糖基化样因子ARL3抗体
驱动蛋白家族成员12抗体
CLMP重组人 ASAM / CLMP 蛋白 Protein
血管活性肠肽(VIP)重组蛋白 Recombinant Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)
HA重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
IL18R1 Protein Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白
Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725, His 标签)
血管活性肠肽(VIP)重组蛋白 Recombinant Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)
IL18R1 Protein Human 重组人 IL18R1 / CD218a 蛋白
CLMP重组人 ASAM / CLMP 蛋白 Protein
Spike Protein MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 (aa 1-725, His 标签)
HA重组甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
兔输尿管上皮细胞大鼠间隙连接蛋白43(CX43)试剂盒 ,英文名: CX43 ELISA Kit
Inu Susuke factor II (HC II) ELISA Kit 犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)试剂盒
RatAi-ypsin,ATELISAKit 大鼠抗(AT)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFFAELISAKit大鼠游离脂肪酸
细胞基质金属蛋白酶(MMP-14)活性荧光定量试剂盒20次(10样本)
RatOrexinAELISAKit大鼠阿立新A(OrexinA)试剂盒规格:96T/48T