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基础信息Product information
产品名称：
兔结肠成纤维细胞
产品简介：
兔结肠成纤维细胞公司正在出售的产品：LHX3蛋白抗体 四分子交联体4/四旋蛋白4/四次跨膜蛋白4抗体 Sema6A抗体 兔脑膜细胞 人肝外胆管上皮细胞 NCI-H647人非小细胞肺癌细胞 RD (人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)
产品型号：
厂商性质：经销商
访问量：23
更新时间：2024-10-31
产品特性Product characteristics
兔结肠成纤维细胞
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
结肠 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7973 |
细胞简介：
兔结肠成纤维分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠成纤维细胞主要分布于外膜（纤维膜或浆膜）结缔组织内。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的结肠成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
实验室分离的兔结肠成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔结肠成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔结肠成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测试盒 可见分光光度法 25管/24样
线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒 可见分光光度法 25管/24样
线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性测试盒 可见分光光度法 25管/24样
α戊二酸脱氢酶（α-KGDH）试剂盒 紫外分光光度法 50管/48样
小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA 试剂盒
Rat endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 大鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒
Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)试剂盒 进口分装
HumanapoproteinB100,apo-B100试剂盒人载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒
植物叶绿体总蛋白定量试剂盒20次
Humaissue-typePlasiminogenActilyse，t-PAELISAKit人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)试剂盒
RNA相关结合蛋白MCG10抗体
磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
IL36A重组小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪组织分化相关蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪组织分化相关蛋白抗原
PROK1重组人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 标签) Protein
FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 标签), Biotinylated
EPHA4 Protein Rat 重组大鼠 EphA4 蛋白
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪组织分化相关蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪组织分化相关蛋白抗原
FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 标签), Biotinylated
IL36A重组小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein
EPHA4 Protein Rat 重组大鼠 EphA4 蛋白
PROK1重组人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 标签) Protein
兔结肠成纤维细胞大鼠类固醇5α还原酶2(SRD5α2)试剂盒 ，英文名： SRD5α2 ELISA Kit
Mouse free three iodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 小鼠游离三甲状腺原(Free-T3)试剂盒
Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 大鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒 进口分装
CLIAKitforGABAELISAKit大鼠γ氨基
细胞过氧化氢酶(CATALASE)催化活性比色法定量试剂盒20次
RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受体(PROGR)试剂盒
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
