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更新时间:2024-10-31
兔肌源性干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨骼肌组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7080 |
细胞简介:
兔肌源性干分离自肌肉组织;肌源性干细胞(MDSCs)属于成体多能干细胞,具有多细胞系分化和自我更新能力。通过诱导刺激,MDSCs可以分化为脂肪、骨骼、软骨、平滑肌和神经细胞等多种细胞和组织类型;作为基因治疗和组织工程的供体细胞,已成为治疗心肌梗死、Duchenne氏肌营养不良等疾病的研究热点;近年来,肌源性干细胞在治疗尿失禁等方面的应用逐步得到重视。需注意的是,肌源性干细胞主要存在于骨骼肌组织中,只是成熟组织的很少部分细胞;平时处于静止状态,在细胞应激和组织缺失时才会激活;并且随着年龄的增加,所含细胞数量逐渐减少,而目前临床疾病的治疗主要是针对成体进行。肌源性干细胞的体外扩增对细胞移植和干细胞介导的基因治疗至关重要。对肌源性干细胞的扩增研究发现,EGF、FGF-2和SCF可以通过减数分裂或促使不分裂细胞进入有丝分裂周期,从而刺激细胞增生。更重要的是,细胞因子诱导的体外扩增可以通过自我更新不刺激细胞分化,从而保持干细胞表型。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的兔肌源性干采用胶原酶--联合消化法结合密度梯度离心、差速贴壁法,最后通过肌源性干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔肌源性干经Sca-1免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠转酶试剂盒 小鼠转酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠转酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠转酶试剂盒、小鼠转酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠基转移酶试剂盒 小鼠基转移酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠基转移酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠基转移酶试剂盒、小鼠基转移酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠表皮生长因子试剂盒 小鼠表皮生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠表皮生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠表皮生长因子试剂盒、小鼠表皮生长因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠棒状杆菌试剂盒 小鼠棒状杆菌试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠棒状杆菌试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠棒状杆菌试剂盒、小鼠棒状杆菌eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠己糖激酶(HK)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human sorbitol dehydrogenase (SDH) ELISA Kit 人脱氢酶(SDH)试剂盒
HumanDNABindingProtein,DBPELISAKit 人DNA结合蛋白(DBP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAi-glucoprotein210,GP210试剂盒人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)试剂盒规格:96T/48T
植物赖羟化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量试剂盒20次
HumanVitaminA,VAELISAKit人A(VA)试剂盒规格:96T/48T
P物质抗体
连接粘附分子2抗体
NRP1重组人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签) Protein
晚期糖基化终末产物受体(AGER)重组蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
LALBA重组人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 标签) Protein
EPCAM Protein Human 重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
晚期糖基化终末产物受体(AGER)重组蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
EPCAM Protein Human 重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
NRP1重组人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签) Protein
HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
LALBA重组人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 标签) Protein
兔肌源性干细胞大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)试剂盒 ,英文名: GMCSF/CSF2 ELISA Kit
Mouse keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)试剂盒/双调蛋白(AR)试剂盒
Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 小鼠骨形成蛋白(BMPs)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanpaxillin,PaxELISAKit人桩蛋白
同位素[γ32P]ATP激酶标记微卫星扩增试剂盒20次
ELISAKitPIAb-IgG/IgM大鼠0脂酰肌醇抗体IgG/IgM