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基础信息Product information
产品名称：
人椎间盘纤维环细胞
产品简介：
人椎间盘纤维环细胞公司正在出售的产品：核蛋白相互作用蛋白1抗体 睾丸高表达蛋白4抗体 S100A2抗体 人子宫内膜上皮细胞 人肾小球系膜细胞 PK-1人胰腺导管腺癌细胞 EA.hy926 (人脐静脉细胞融合细胞)
产品型号：
厂商性质：经销商
访问量：26
更新时间：2024-10-31
产品特性Product characteristics
人椎间盘纤维环细胞
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
椎间盘组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7530 |
细胞简介：
人椎间盘纤维环分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。
方法简介：
公司实验室分离的人椎间盘纤维环采用胶原酶-联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的人椎间盘纤维环经Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
十六烷基基溴化胺 50g
CTAB 250g
5’-三0酸胞苷三盐 50mg
CTP 100mg
豚鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒 ，英文名： ANG-Ⅱ ELISA Kit
Human proteolipid protein (PLP) ELISA Kit 人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)试剂盒
Monkeyacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit乙酰受体抗体(AChRab)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBMG/Beta2-MG(HumanBeta2-microglobulin)ELISAKit人β2微球蛋白
细菌内毒素浊度法定量试剂盒20次
RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)试剂盒规格：96T/48T
E选择素抗体
胱抑素C单克隆抗体（包被）
EPHA4重组食蟹猴 EphA4 蛋白 (Fc 标签) Protein
MMP-1 基质金属蛋白酶-1 0.5mgMMP-1 基质金属蛋白酶-1
SERPINA12重组人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
IL10 Protein Human 重组人 IL10 / Interleukin-10 蛋白
F7 Protein Mouse 重组小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
MMP-1 基质金属蛋白酶-1 0.5mgMMP-1 基质金属蛋白酶-1
IL10 Protein Human 重组人 IL10 / Interleukin-10 蛋白
EPHA4重组食蟹猴 EphA4 蛋白 (Fc 标签) Protein
F7 Protein Mouse 重组小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
SERPINA12重组人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
人椎间盘纤维环细胞大鼠尿卟啉原脱羧酶(UROD)试剂盒 ，英文名： UROD ELISA Kit
Monkey E selectin (E-Selectin/CD62E) ELISA Kit 猴E选择素(E-Selectin/CD62E)试剂盒
RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGM-CSFAb(Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody)ELISAKit人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体
细胞氧化酶(DAO)活性荧光定量试剂盒20次
RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒规格：96T/48T
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
