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更新时间:2024-10-30
人阴道平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
阴道 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8164 |
细胞简介:
人阴道平滑肌分离自阴道组织;阴道位于膀胱、尿道和直肠之间,是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能,是连接子宫与外阴的通道,是排出月经血、娩出婴儿的必经之路,也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层,即黏膜层、肌层和外膜。平滑肌,是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。阴道平滑肌分离自阴道壁肌层组织,平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介:
实验室分离的人阴道平滑肌采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人阴道平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人阴道平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔抗内皮细胞抗体(AECA)试剂盒 96T/48T
兔抗单核细胞抗体(AMA)试剂盒 96T/48T
兔碱性0酸酶(ALP)试剂盒 96T/48T
兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)试剂盒 96T/48T
小鼠I型胶原蛋白(COL-1)试剂盒 96T/48T
Rat deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 大鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)试剂盒
HumanDihydrotestosterone,DHTELISAKit 人双轻睾酮(DHT)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCollagenaseI试剂盒人胶原酶I(CollagenaseI)试剂盒规格:96T/48T
组织5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量试剂盒20次
Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)试剂盒规格:96T/48T
bFGF重组兔单克隆抗体
富含半胱与表皮生长因子样蛋白1抗体
EDAR重组大鼠 EDAR 蛋白 (Fc 标签) Protein
GRP78(glucose regulated protein 78 0.5mgGRP78(glucose regulated protein 78) 葡萄糖调节蛋白78抗原(热休克蛋白70蛋白5)
ECE1重组人 ECE1 蛋白 Protein
HMGN3 Protein Human 重组人 HMGN3 蛋白
PLA2G2E Protein Mouse 重组小鼠 PLA2G2E 蛋白
GRP78(glucose regulated protein 78 0.5mgGRP78(glucose regulated protein 78) 葡萄糖调节蛋白78抗原(热休克蛋白70蛋白5)
HMGN3 Protein Human 重组人 HMGN3 蛋白
EDAR重组大鼠 EDAR 蛋白 (Fc 标签) Protein
PLA2G2E Protein Mouse 重组小鼠 PLA2G2E 蛋白
ECE1重组人 ECE1 蛋白 Protein
人阴道平滑肌细胞大鼠鞘醇-1-0酸0酸酶2(SGPP2)试剂盒 ,英文名: SGPP2 ELISA Kit
Mouse angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 小鼠血管生成素2(ANG-2)试剂盒
RatAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGS-ANA(Humangranulocytespecificainuclearaibody)ELISAKit人粒细胞特异性抗核抗体
细胞单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量试剂盒20次
RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。