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更新时间:2024-10-30
人牙周膜干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
牙周膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7677 |
细胞简介:
人牙周膜干分离自牙周膜组织;牙周膜(牙周韧带、牙周间隙)是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束,纤维的一端埋于牙骨质内,另一端则埋于牙槽窝骨壁里,使牙齿固位于牙槽窝内;牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源于胚胎时期的中胚层组织,具有很强的自我复制和多向分化潜能,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力,运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景,目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。牙周膜干细胞参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在,利用牙周膜干细胞建立体外模型,已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人牙周膜干采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人牙周膜干经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠神经营养素4(mouse -4) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠(mouse NO) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠骨保护素(mouse OPG) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠骨桥素(mouse OPN) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒
HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神经生长导向因子Slit2试剂盒 96T/48T 进口分装
DuckIerleukin2,IL-2试剂盒鸭白介素2(IL-2)试剂盒规格:96T/48T
枣椰树(datepalm)培养基500毫升溶液/片剂
MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脱氢表雄同(DHEA)试剂盒规格:96T/48T
AF750标记的髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白抗体
二酰基甘油酰基转移酶2样蛋白4抗体
CA10重组人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein
颗粒酶H(GZMH)重组蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)
VTI1A重组人 VTI1A 蛋白 Protein
CLEC4D Protein Human 重组人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白
HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
颗粒酶H(GZMH)重组蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)
CLEC4D Protein Human 重组人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白
CA10重组人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein
HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
VTI1A重组人 VTI1A 蛋白 Protein
人牙周膜干细胞大鼠热休克转录因子1(HSF1)试剂盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)试剂盒
RatAquaporin3,AQP-3ELISAKit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGuineapigierleukin4,IL-4ELISAKit豚鼠白介素4
细胞长链脂酰脱氢酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量试剂盒20次
Rattyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激酶2(Tie-2)试剂盒规格:96T/48T