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更新时间:2024-10-30
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:人肾小球系膜细胞
组织来源:肾组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人肾小球系膜分离自肾小球组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球系膜是位于肾小球毛细血管袢之间的一种特殊间充质,由系膜细胞和系膜基质组成。肾小球系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞,具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。肾小球系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现。肾小球系膜细胞的培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。系膜细胞的主要作用可能有:①收缩作用,入球小动脉和出球动脉的收缩作用受系膜细胞的调节,以影响毛细血管袢的内压和滤过率;②支持作用,它填充于毛细血管袢之间,支持毛细血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜内的大分子物质和蛋白质;④分泌肾素,在肾缺血或免疫复合物沉积时,系膜细胞增生且分泌肾素。
方法简介:
公司实验室分离的人肾小球系膜采用机械研磨法结合不同孔径不锈钢网筛过滤后使用胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人肾小球系膜经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
血液基因组DNA中量提取试剂盒(离心柱型) Blood genomic DNA Exaction Kit (cenifugal column type)
血液基因组DNA大量提取试剂盒(离心柱型) Blood genomic DNA Exaction Kit (cenifugal column type)
动物盒 Animal tissue genomic Exaction Kit
细胞基因组提取试剂盒 Cell genome Exaction Kit
小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human salivary duct aoaibody (SDA) ELISA Kit 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)试剂盒
Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit 人1,3-二0酸甘油酸(1,3-DPG)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACA-IgG(Mouseai-cardiolipinaibodyIgG)ELISAKit小鼠抗心0脂抗体IgG
药品乙酸激酶法定量试剂盒20次
Mouseovariancancermarker-CA125ELISAKit小鼠卵巢癌标志物CA125试剂盒规格:96T/48T
原癌蛋白CBL2单克隆抗体
RhoA抗体
ACVR1C重组食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 蛋白 (Fc 标签) Protein
MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 层粘连蛋白受体1抗原(C端)
NEGR1重组人 NEGR1 蛋白 Protein
CBLC Protein Human 重组人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 标签)
FLT3LG Protein Mouse 重组小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 标签)
MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 层粘连蛋白受体1抗原(C端)
CBLC Protein Human 重组人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 标签)
ACVR1C重组食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 蛋白 (Fc 标签) Protein
FLT3LG Protein Mouse 重组小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 标签)
NEGR1重组人 NEGR1 蛋白 Protein
人肾小球系膜细胞大鼠素受体1(C1)试剂盒 ,英文名: C1 ELISA Kit
Preptin ELISA Kit 人preptin 试剂盒
RatNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforcTn-I(HumancardiacoponinI)ELISAKit人心肌肌钙蛋白Ⅰ
细胞糖原合成酶(GLYCOGENsyhase)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次
Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)试剂盒规格:96T/48T
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