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更新时间:2024-10-30
人前列腺基质细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
前列腺 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7703 |
细胞简介:
人前列腺基质分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。常见疾病为良性前列腺增生,在病理学上良性前列腺增生症又称前列腺结节状增生,是前列腺中最常见的产生症状的瘤样病变,结节开始发生可能是基质细胞自发逆转至胚胎阶段,其生长潜力可能是基质-上皮之间的相互协同作用所致,最终形成前列腺增生。基质细胞是器官中结缔组织细胞,起到为器官中实质细胞提供支持和营养的作用,成纤维细胞、炎症细胞、免疫细胞以及周皮细胞都是常见的基质细胞类型。基质细胞和肿瘤细胞的相互作用在肿瘤细胞的生长过程中具有重要作用。体外培养人前列腺基质细胞对治疗前列腺增生有重要的研究意义。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人前列腺基质采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人前列腺基质经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 贴壁不包被
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)试剂盒 96T/48T
兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)试剂盒 96T/48T
兔坏死因子α(TNF-α)试剂盒 96T/48T
兔脂蛋白α(Lp-α)试剂盒 96T/48T
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human vitamin C (VC) ELISA Kit 人C(VC)试剂盒
Humancalmodulin,CAMELISAKit 人钙调素(CAM)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanchemerin试剂盒人chemerin试剂盒规格:96T/48T
转基因玉米NK603品系试剂盒20次
Humanserineprotease,PRSSELISAKit人丝蛋白酶(PRSS)试剂盒规格:96T/48T
锌指蛋白693抗体
LRIT3蛋白抗体
SEMA4D重组大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
FOXJ1/HFH-4 peptide 插头蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插头蛋白J1抗原
SULT1A1重组人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein
GPX7 Protein Human 重组人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 标签)
EPHB4 Protein Mouse 重组小鼠 EphB4 / HTK 蛋白
FOXJ1/HFH-4 peptide 插头蛋白J1抗原 0.5mgFOXJ1/HFH-4 peptide 插头蛋白J1抗原
GPX7 Protein Human 重组人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 蛋白 (Fc 标签)
SEMA4D重组大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 Protein
EPHB4 Protein Mouse 重组小鼠 EphB4 / HTK 蛋白
SULT1A1重组人 SULT1A1 / STP1 蛋白 Protein
人前列腺基质细胞大鼠胃动蛋白1(GKN1)试剂盒 ,英文名: GKN1 ELISA Kit
Mouse aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforhs-CRP(HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein)ELISAKit人超敏C反应蛋白
细胞NAD依赖性甘油-3-0酸脱氢酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光谱法定量试剂盒20次
ELISAKitBTC大鼠β细胞素