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更新时间:2024-10-30
人皮层神经元细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脑组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 神经元细胞样 | YS-01X7385 |
细胞简介:
人皮层神经元分离自脑皮层组织;皮层神经元细胞是构成中枢神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突触(轴突)的细胞,它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘,组成神经纤维,它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中,细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞体是细胞含核的部分,其形状大小有很大差别,直径约4-120微米。核大而圆,位于细胞中央,染色质少,核仁明显。细胞质内有斑块状的核外染色质,还有许多神经元纤维。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分,又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突,可以接受刺激并将兴奋传入细胞体。每个神经元只有一个轴突,可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织,如肌肉或腺体。皮质神经元是大脑皮质的主要组成细胞之一,是大脑进行功能活动调节的基本单位,参与动物多种中枢神经系统疾病的病理过程。通过形态学观察显示神经元从贴壁、伸出突起开始;突起逐渐增多,而后突起进一步增多并逐渐成网,同时细胞胞体增大,周边光晕明显。10-12d细胞最为丰满,随后神经元开始裂解,突起逐渐减少,细胞已退化变性,轮廓模糊,光晕消失,细胞变形。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人皮层神经元采用消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人皮层神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)试剂盒 96T/48T
小鼠脱氢酶E1(PDHE1)试剂盒 96T/48T
小鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)试剂盒 96T/48T
小鼠激酶(PK)试剂盒 96T/48T
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human killer cell lectin like receptor (KLR) ELISA Kit 人杀伤细胞凝集素样受体(KLR)试剂盒
Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit 人重组激活基因2(RAG-2)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-gliadinaibody,AGA试剂盒人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)试剂盒规格:96T/48T
植物赖(lysine)含量荧光定量试剂盒20次
HumanVitaminB12,VB12ELISAKit人B12(VB12)试剂盒规格:96T/48T
细胞维甲酸结合蛋白1抗体
FITM1蛋白抗体
COL4A3重组大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 标签) Protein
ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3 0.5mgENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
CLEC3B重组人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 Protein
ENTPD5 Protein Human 重组人 ENTPD5 蛋白
CES5A Protein Mouse 重组小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白
ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3 0.5mgENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
ENTPD5 Protein Human 重组人 ENTPD5 蛋白
COL4A3重组大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 标签) Protein
CES5A Protein Mouse 重组小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白
CLEC3B重组人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 Protein
人皮层神经元细胞大鼠细胞绒毛蛋白(CVL)试剂盒 ,英文名: CVL ELISA Kit
Mouse kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)试剂盒
Mousecardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 小鼠心肌转录因子GATA4试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHsp-60ELISAKit大鼠热休克蛋白60
细胞LYNB激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-1β大鼠白介素1β