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更新时间:2024-10-30
人颅盖造骨细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
颅骨组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7320 |
细胞简介:
人颅盖造骨分离自颅骨组织;造骨细胞(osteoblast)亦称成骨细胞。是参与骨组织形成的细胞。颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。
方法简介:
公司实验室分离的人颅盖造骨采用胶原酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人颅盖造骨经ALP染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒、小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒、小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血小板衍生生长因子试剂盒 小鼠血小板衍生生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血小板衍生生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血小板衍生生长因子试剂盒、小鼠血小板衍生生长因子试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胰岛素样生长因子试剂盒 小鼠胰岛素样生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰岛素样生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰岛素样生长因子试剂盒、小鼠胰岛素样生长因子试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血管紧张素转换酶(ACE)试剂盒 96T/48T
Rat calcium binding protein (CR) ELISA Kit 大鼠钙结合蛋白(CR)试剂盒
Humanai-myelinaibodyIgAELISAKit 人抗髓0脂抗体IgA(ai-myelinAb)试剂盒 96T/48T 进口分装
CamelBeta-Endorphin,β-EP试剂盒β内啡肽(β-EP)试剂盒规格:96T/48T
鱼类组织元素荧光定量试剂盒20次
Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit小鼠胰岛素自身抗体(IAA)试剂盒规格:96T/48T
丝组合因子4抗体
ATP酶2C2抗体
PDCD1重组人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
尾加压素2(UST2)重组蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)
RAET1E重组人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD55 Protein Human 重组人 CD55 / DAF 蛋白
HA Protein H1N3 重组甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
尾加压素2(UST2)重组蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)
CD55 Protein Human 重组人 CD55 / DAF 蛋白
PDCD1重组人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein
HA Protein H1N3 重组甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
RAET1E重组人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 标签) Protein
人颅盖造骨细胞大鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)试剂盒 ,英文名: UCP1 ELISA Kit
Pla vitamin E (VE) ELISA Kit 植物(VE)试剂盒
MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 小鼠免疫球蛋白E(IgE)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血浆α颗粒膜蛋白
细胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性试剂盒20次
ELISAKitSOD大鼠超氧化物歧化酶
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。