人角膜成纤维细胞

产品简介：

产品型号：

厂商性质：经销商

访问量：33

更新时间：2024-10-30

本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！

产品名称：人角膜成纤维细胞

组织来源：眼角膜组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞简介：

人角膜成纤维分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的角膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。角膜成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持角膜的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

方法简介：

公司实验室分离的人角膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人角膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品：

小鼠血栓素试剂盒   小鼠血栓素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血栓素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠血栓素试剂盒、小鼠血栓素试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠血栓前体蛋白试剂盒   小鼠血栓前体蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血栓前体蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠血栓前体蛋白试剂盒、小鼠血栓前体蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠血清总补体试剂盒   小鼠血清总补体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血清总补体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠血清总补体试剂盒、小鼠血清总补体试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒   小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒、小鼠血清淀粉样蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA 试剂盒 96T/48T

Hei Amy Ba aigen ELISA Kit 人痢疾内阿米巴抗原试剂盒

Humanprostacycline,PGIELISAKit 人前列环素(PGI)试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickenadrenomedullin,ADM试剂盒鸡肾上腺髓质素(ADM)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞AKT蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)试剂盒规格：96T/48T

神经束蛋白抗体

6号染色体开放阅读框186抗体

TACSTD2重组人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

性激素结合球蛋白(SHBG)重组蛋白 Recombinant Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)

GH1重组人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein

CD69 Protein Human 重组人 CD69 蛋白

Spike Protein SARS 重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, His 标签)

性激素结合球蛋白(SHBG)重组蛋白 Recombinant Sex Hormone Binding Globulin (SHBG)

CD69 Protein Human 重组人 CD69 蛋白

TACSTD2重组人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

Spike Protein SARS 重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, His 标签)

GH1重组人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白 Protein

人角膜成纤维细胞大鼠胸肾表达趋化因子(BRAK)试剂盒 ，英文名： BRAK ELISA Kit

Pla gibberellic acid (GA) ELISA Kit 植物赤霉素(GA)试剂盒

MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 小鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanAi-ThrombinIII,AT-IIIELISAKit人抗Ⅲ抗体

细胞FES激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitBigET大鼠大内皮素

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作