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厂商性质:经销商
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更新时间:2024-10-30
人关节软骨细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
关节软骨组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7327 |
细胞简介:
人关节软骨分离自关节软骨组织;关节软骨属于透明软骨,表面光滑、呈淡蓝色、有光泽,它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架,这种框架呈半环形,类似拱形球门,其底端紧紧附着在下面的骨质上,上端朝向关节面,这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来,同时当受到压力时候,还可以有少许的变形,起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间,散在分布着软骨细胞,软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成,这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有神经支配,也没有血管,其营养成分必须从关节液中取得,而其代谢废物也必须排至关节液中,关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动,使关节软骨不断的受到压力刺激才行,所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层,单个分布、体积较小、呈椭圆形,长轴与关节软骨表面平行,越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形、染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内,这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,关节软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,关节软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的人关节软骨采用胶原酶联合消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人关节软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒 96T/48T
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)试剂盒 96T/48T
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)试剂盒 96T/48T
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)试剂盒 96T/48T
小鼠核因子κB(NF-κB)试剂盒 96T/48T
Human adrenal coex aibody (ACA) ELISA Kit 人肾上腺皮质抗体(ACA)试剂盒
humanAi-thyroid-globulinaibody,ATGAELISAKIT 人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-OJ-aibody,OJ/IleRS试剂盒人OJ抗体/抗异亮氨酰NA合成酶抗体(OJ/IleRS)试剂盒规格:96T/48T
植物B1高效液相色谱法定量试剂盒20次
humanubiquitinD,UBDELISAKit人泛素蛋白D(UBD)试剂盒规格:96T/48T
溶质携带物家族-1抗体
11号染色体开放阅读框5抗体
DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein
C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)重组蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)
BPIFA2重组人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 Protein
FABP1 Protein Human 重组人 L-FABP / FABP1 蛋白
FCGR3A Protein Rat 重组大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白
VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)重组蛋白 Recombinant VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF)
FABP1 Protein Human 重组人 L-FABP / FABP1 蛋白
CLEC10A重组小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 标签) Protein
IFNG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
SMPDL3A重组人 SMPDL3A 蛋白 Protein
人关节软骨细胞大鼠血管内皮细胞蛋白C受体(PROCR)试剂盒 ,英文名: PROCR ELISA Kit
Mouse hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 小鼠羟脯(Hyp)试剂盒
Mousemaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 小鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanBetaLactoglobulin,Beta-LgELISAKit人β乳球蛋白
细胞D-葡萄糖氧化法定量试剂盒20次
ELISAKitFⅧAg大鼠第八因子相关抗原
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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