人宫颈癌成纤维细胞

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更新时间：2024-10-30

人宫颈癌成纤维细胞

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细胞简介：

人宫颈癌组织源成纤维分离自患有宫颈癌病人的宫颈癌组织；宫颈癌也称子宫颈癌，指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤，是女性常见恶性肿瘤之一，发病率位于女性肿瘤的位。宫颈癌可向邻近组织和器官直接蔓延，向下至阴道穹窿及阴道壁，向上可侵犯子宫体，向两侧可侵犯盆腔组织，向前可侵犯膀胱，向后可侵犯直肠。也可通过淋巴管转移至宫颈旁、髂内、髂外、腹股沟淋巴结，晚期甚至可转移到锁骨上及全身其他淋巴结。血行转移比较少见，常见的转移部位是肺、肝及骨。肿瘤微环境即肿瘤细胞生存的外部环境，由不同种类的非肿瘤性的细胞与细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）构成，包括纤维细胞，免疫细胞，内皮细胞，间充质干细胞等，肿瘤细胞通过调控这些间质细胞，创造出有利于自身侵袭转移的条件，从而使得肿瘤得到进展。越来越多的证据表明，肿瘤微环境的改变在肿瘤进展中扮演着重要的角色。在肿瘤微环境中，研究最多也是最主要的间质细胞是肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）。CAFs 主要由肿瘤周边的正常成纤维细胞和成纤维细胞样细胞演化而来。宫颈癌组织源成纤维细胞多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。刚分离的宫颈癌组织源成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的人宫颈癌成纤维采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人宫颈癌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代及冻存：

原代细胞的培养方法一般有以下4种：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

公司正在出售的产品：

豚鼠P物质   英文名称：   Guinea pig Substance P   规格：      英文缩写：   SP

豚鼠睾激素   英文名称：   Guinea pig Testosterone   规格：      英文缩写：   TESTO

豚鼠免疫球蛋白E   英文名称：   Immunoglobulin E   规格：      英文缩写：   IgE

豚鼠粘多糖   英文名称：   Mucopolysaccharide   规格：      英文缩写：   MLC

小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 大鼠前列腺素E2(PGE2)试剂盒

Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanBigEndothelin,BigET试剂盒人大内皮素(BigET)试剂盒规格：96T/48T

植物总氨基酸含量比色法定量试剂盒20次

HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit人超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒规格：96T/48T

桥粒斑菲素蛋白3抗体

转录因子ELYS蛋白抗体

M1重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

RELT重组人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

FSTL5 Protein Human 重组人 FSTL5 蛋白 (Fc 标签)

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 标签)

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

FSTL5 Protein Human 重组人 FSTL5 蛋白 (Fc 标签)

M1重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 标签)

RELT重组人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

人宫颈癌成纤维细胞大鼠血红素氧合酶1(HO1)试剂盒 ，英文名： HO1 ELISA Kit

Mouse coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)试剂盒

Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AILR3ELISAKit 小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumancecropinB,CecBELISAKit人杀菌肽B

细胞C-MET激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitDAT大鼠多巴胺转运蛋白

原代细胞的培养条件：

　　一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

　　1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；

　　2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；

　　3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；

　　4、 胎牛血清浓度为10%-80%

　　5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；

　　6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；

　　7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；

　　8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。

　　二、悬浮细胞培养

　　1、原代培养时要尽量去除红细胞；

　　2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；

　　3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；

　　4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；

　　5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；

　　6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。