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更新时间:2024-10-30
人肝内胆管上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肝脏组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7168 |
细胞简介:
人肝内胆管上皮分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收,在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用,肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%,其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能,参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程,在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明,常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病,都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位,进而引起肝内胆管上皮损伤。因此,了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的人肝内胆管上皮采用胶原酶灌注消化法后,再用胶原酶-DNA酶联合消化,接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中,通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人肝内胆管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子组织因子(TF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子骨胶原交联(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子组织多肽抗原(TPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠苯(LPA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human general anscription complex (GTC) ELISA Kit 人通用转录复合体(GTC)试剂盒
HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4ELISAKit 人周期素依赖性激酶4(CDK-4)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1试剂盒人癌易感蛋白1(BRCA-1)试剂盒规格:96T/48T
植物组织细胞核高分离试剂盒10次
HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)试剂盒规格:96T/48T
胚胎干细胞关键蛋白2抗体
周期素依赖性激酶9抗体
LGMN重组野猪 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein
NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神经纤维瘤抗原
TNFRSF8重组人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein
GADD45G Protein Human 重组人 GADD45G / CR6 蛋白
CCNE1 Protein Mouse 重组小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 标签)
NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神经纤维瘤抗原
GADD45G Protein Human 重组人 GADD45G / CR6 蛋白
LGMN重组野猪 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein
CCNE1 Protein Mouse 重组小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 标签)
TNFRSF8重组人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein
人肝内胆管上皮细胞大鼠血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)试剂盒 ,英文名: PECAM1 ELISA Kit
Mouse coagulation (F x) ELISA Kit 小鼠Ⅹ(FⅩ)试剂盒
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumancoagulationfactorIX,FIXELISAKit人Ⅸ
细胞CDK5/P35激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitCR大鼠钙结合蛋白
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。