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更新时间:2024-10-30
人肝癌组织源细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肝癌组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7438 |
细胞简介:
人肝癌组织源分离自患有肝癌病人的肝癌组织;肝癌即肝脏恶性肿瘤,可分为原发性和继发性两大类。原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮或间叶组织,前者称为原发性肝癌,是我国高发的,危害极大的恶性肿瘤;后者称为肉瘤,与原发性肝癌相比较较为少见。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。一般多见于胃、胆道、胰腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官恶性肿瘤的肝转移。原发性肝癌的病因及确切分子机制尚不清楚,目前认为其发病是多因素、多步骤的复杂过程,受环境和饮食双重因素影响。流行病学及实验研究资料表明,乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染、、饮水污染、酒精、肝硬化、性激素、亚硝胺类物质、微量元素等都与肝癌发病相关。继发性肝癌(转移性肝癌)可通过不同途径,如随血液、淋巴液转移或直接侵润肝脏而形成疾病。
方法简介:
公司实验室分离的癌组织源采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人肝癌组织源经检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒 96T/48T
小鼠内皮素1(ET-1)试剂盒 96T/48T
小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)试剂盒 96T/48T
小鼠内毒素(ET)试剂盒 96T/48T
小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)试剂盒
HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量细胞角蛋白(CK-LMW)试剂盒 96T/48T 进口分装
Guineapigierleukin4,IL-4试剂盒豚鼠白介素4(IL-4)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量试剂盒20次
Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)试剂盒规格:96T/48T
内皮细胞清道夫受体抗体
肿瘤蛋白P73抗体
MCAM重组人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 标签) Protein
天冬转氨酶(AST)重组蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
PEBP1重组人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
CPM Protein Human 重组人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
HA Protein H5N2 重组甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
天冬转氨酶(AST)重组蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
CPM Protein Human 重组人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
MCAM重组人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 标签) Protein
HA Protein H5N2 重组甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
PEBP1重组人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
人肝癌组织源细胞大鼠盐皮质激素受体(MR)试剂盒 ,英文名: MR ELISA Kit
Mouse thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 小鼠抗复合物(TAT)试剂盒
MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人补体片断3a
细胞CASEINKINASE1δ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitOFQ/N大鼠孤腓肽
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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