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更新时间:2024-10-30
大鼠子宫颈上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
子宫组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7203 |
细胞简介:
大鼠子宫颈上皮分离自子宫颈组织;子宫颈位于子宫下部,近似圆锥体,上端与子宫体相连,下端深入阴道。阴道顶端的穹隆又将子宫颈分为两部分:宫颈突入阴道的部分称宫颈阴道部,在阴道穹隆以上的部分称宫颈阴道上部。宫颈的中央为前后略扁的长梭性管腔,其上端通过宫颈内口与子宫腔相连,其下端通过宫颈外口开口于阴道。内外口之间即宫颈管。宫颈的大小与宫体比例随年龄及内分泌状态等而变化;宫颈壁由黏膜、肌层和外膜组成。子宫颈可有多种疾病,包括胚胎发育异常、炎症、瘤样病变、良性肿瘤、恶性肿瘤、损伤、宫颈性不孕、辅助生育技术、宫颈与性、宫颈妊娠等许多问题,体外培养的子宫颈上皮细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠子宫颈上皮采用先胶原酶消化、后组织贴块法,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠子宫颈上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠碱性0酸酶(ALP)试剂盒 96T/48T
小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)试剂盒 96T/48T
小鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)试剂盒 96T/48T
小鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)试剂盒 96T/48T
小鼠0酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human prostaglandin D syhase (PGDS) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶(PGDS)试剂盒
HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit 人Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAdenovirusIgM,ADV-IgM试剂盒人腺病毒IgM(ADV-IgM)试剂盒规格:96T/48T
植物3-0酸甘油脱氢酶(GAPDH)活性酶动力比色法定量试剂盒20次
Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1,AFP-L1ELISAKit小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)试剂盒规格:96T/48T
立即早期癌基因BRLF1/鼻咽癌基因抗体
锌指蛋白737抗体
CD6重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD72分子(CD72)重组蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)
AZGP1重组人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein
DAPK3 Protein Human 重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签)
CST3 Protein Rat 重组大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白
钙非依赖性0脂酶A2(iPLA2)重组蛋白 Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)
DAPK3 Protein Human 重组人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 标签)
PREP重组小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白 Protein
CXCL13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白
MAP1LC3B重组人 LC3B / MAP1LC3B 蛋白 Protein
大鼠子宫颈上皮细胞大鼠载脂蛋白B100(APOB100)试剂盒 ,英文名: APOB100 ELISA Kit
Mouse phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 小鼠0脂酶A2(PL-A2)试剂盒
MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 小鼠白血病抑制因子(LIF)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanFibrinogen,FbgELISAKit人血纤蛋白原
细胞/组织高质化溶酶体分离试剂盒10次
ELISAKitMMP-4大鼠基质金属蛋白酶4
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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