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更新时间:2024-10-29
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产品名称:大鼠支气管平滑肌细胞
组织来源:支气管组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠支气管平滑肌分离自支气管组织;支气管(Bronchi),是指由支气管分出的各级分枝,由支气管分出的一级支气管,即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较,前者较细长,走向倾斜;后者较粗短,走向较前者略直,所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是,支气管是以“C"型的支气管软骨为支架,而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能:①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力,保持支气管形态;②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础;③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质,发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠支气管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠支气管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒 96T/48T
小鼠可溶性瘦素受体(sLR)试剂盒 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)试剂盒 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)试剂盒 96T/48T
小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat noradrenaline (NA) ELISA Kit 大鼠去甲(NA)试剂盒
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit 人型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2试剂盒人癌易感蛋白2(BRCA-2)试剂盒规格:96T/48T
植物组织线粒体超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分离试剂盒50次
Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit人脱氢酶(SDH)试剂盒规格:96T/48T
拮抗凋亡转录因子重组兔单克隆抗体
酰基脱氢酶长链抗体
SLPI重组人 SLPI 蛋白 Protein
SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽
EPCAM重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein
CSF3 Protein Human 重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
NRP1 Protein Human 重组人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签)
SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽
CSF3 Protein Human 重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
SLPI重组人 SLPI 蛋白 Protein
NRP1 Protein Human 重组人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签)
EPCAM重组人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein
大鼠支气管平滑肌细胞大鼠脂联素受体2(ADIPOR2)试剂盒 ,英文名: ADIPOR2 ELISA Kit
Mouse soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒
MouseGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanhiston-H2bELISAKit人组蛋白H2b
B3比色法定量试剂盒20次
ELISAKitCollagenaseII大鼠胶原酶II
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
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