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更新时间:2024-10-29
大鼠真皮毛乳头细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
毛囊 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7960 |
细胞简介:
大鼠真皮毛乳头分离自皮肤毛囊组织;毛囊是表皮细胞连续形成的袋样上皮。其基底是真皮凹进的真皮毛乳头,中心是一根毛发,立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上,附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈,毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中,毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度,它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成,除了具有结缔组织和血管的真皮乳头(毛乳头)外,毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。真皮毛乳头细胞位于毛囊基底部,是一类成纤维细胞。在毛囊发育早期,真皮细胞向单层上皮细胞发出真皮信号,刺激上皮局部形成毛基板。随后毛基板细胞向下方的真皮发出表皮信号,诱导其形成有成纤维细胞组成的凝集细胞团。在此过程中,毛母质细胞逐渐包裹凝集细胞团,形成成熟的真皮毛乳头细胞。作为毛囊中的重要细胞群,真皮毛乳头细胞的分子机制和临床应用正在被逐渐认识和解析。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的大鼠真皮毛乳头采用胶原酶-混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠真皮毛乳头经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠真皮毛乳头细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
血管内皮生长因子受体2 英文名称: vascuiar endothelial growth factor receptor 2 规格: 英文缩写: VEGF-R2
血管内皮生长因子受体3 英文名称: vascuiar endothelial growth factor receptor 3 规格: 英文缩写: VEGF-R3
血管活性肠肽 英文名称: vasoactine inestinal peptide 规格: 英文缩写: VIP
内脂素/内脏脂肪素 英文名称: Visfatin 规格: 英文缩写: Visfatin
小鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai histone aibody (AHA) ELISA Kit 人抗组蛋白抗体(AHA)试剂盒
HumanNeurotensin,ELISAKit 人神经降压素()试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitfor8-iso-PGELISAKit大鼠8异前列腺素
异硫酸胍1公斤
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)试剂盒规格:96T/48T
间隙连接蛋白40抗体
细胞因子受体样因子1抗体
EGF重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein
ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
IFNG重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein
CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白
FSTL1 Protein Mouse 重组小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 标签)
ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白
EGF重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein
FSTL1 Protein Mouse 重组小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 标签)
IFNG重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein
大鼠真皮毛乳头细胞大鼠酯转移蛋白(CETP)试剂盒 ,英文名: CETP ELISA Kit
Porcine oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit 猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)试剂盒
ELISA 小鼠激活素A(mouse Activin A) 进口分装
CLIAKitforLPA(HumanL-phenylalanine)ELISAKit人苯
通用型1毫升1厘米光径塑料比色皿1个
ELISAKitALV-AG鸡白血病病毒抗原
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