大鼠心脏干细胞

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更新时间：2024-10-29

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产品名称：大鼠心脏干细胞

组织来源：心脏组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞简介：

大鼠心脏干分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。研究发现，心脏干细胞是一种多潜能细胞，具有再生和克隆能力，并可分化为心肌细胞、平滑肌细胞和血管内皮细胞。体内研究显示，从心脏中分离出的心脏干细胞，经体外简单培养、增殖和标记后，移植到心肌梗死边缘区域，心梗血流动力学和心室壁厚度较对照组明显改善，心肌梗死边缘区域发现有标记的心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞。尽管其新生心肌细胞较小，但表达一些特殊肌蛋白如心脏肌球蛋白重链、α-肌动蛋白、α-辅肌动蛋白、连接蛋白等，证实了心脏干细胞对心肌梗死的修复作用。干细胞移植治疗是目前心肌梗死和缺血性心脏病细胞重建的主要方法，成体干细胞中的c-kit阳性心脏干细胞因其来源于心脏，有定向心脏细胞系分化的趋势，体内外可以分化成心肌细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞，同时自体移植不存在免疫排斥反应及伦理问题已经成为目前研究的热点。短期内获得治疗量的自体心脏干细胞是这一治疗应用于临床的关键所在。因此，研究一种新的分离培养方法可在短时期内获得大量纯度较高的自体c-kit阳性心脏干细胞成为目前干细胞领域研究的热点问题之一。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠心脏干采用机械剪碎组织、胶原酶分次消化法结合差速贴壁、心脏干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠心脏干经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品：

小鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)试剂盒   96T/48T

小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)试剂盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白M(IgM)试剂盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白G(IgG)试剂盒   96T/48T

小鼠固酮(ALD)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 人型纤溶酶原激活物(uPA)试剂盒

Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 人碱性胎儿蛋白(BFP)试剂盒 96T/48T 进口分装

Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLA试剂盒豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞活性线粒体分离试剂盒10次

Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)试剂盒规格：96T/48T

干扰素调节因子9抗体

视网膜母细胞瘤结合蛋白5抗体

PDCD1重组狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein

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SIRPG重组人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein

CREB3L1 Protein Human 重组人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 标签)

NTRK1 Protein Mouse 重组小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签)

Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 纳曲酮偶联牛血清白蛋白：纳曲酮偶联血蓝蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 纳曲酮偶联牛血清白蛋白：纳曲酮偶联血蓝蛋白

CREB3L1 Protein Human 重组人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 标签)

PDCD1重组狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Mouse 重组小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签)

SIRPG重组人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein

大鼠心脏干细胞大鼠阻抑素(PHB)试剂盒 ，英文名： PHB ELISA Kit

Mouse tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)试剂盒

MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 小鼠神经生长导向因子Slit2试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌标志物

土壤砷元素比色法定量试剂盒20次

ELISAKitA大鼠抗受体

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作