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更新时间:2024-10-29
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:大鼠小梁网细胞
组织来源:眼球
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
大鼠小梁网分离自眼球组织;小梁网由角膜基质纤维、后界膜和角膜内皮向后扩展而成,覆盖在巩膜静脉窦的内侧。小梁网细胞在眼内压调节中起着关键作用;小梁网细胞内有特定的神经递质和神经肽受体,其中包括肾上腺素、乙酰和神经肽Y。青光眼是由于眼内压力升高而造成的一种不可逆致盲眼病,小梁网细胞的体外培养是青光眼病因学研究的重要手段之一。在小梁网细胞中,一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制,小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属蛋白酶。形态学观察可见,刚从组织块长出的原代细胞,形态各异,多数呈星状或不规则形。细胞有胞突,核椭圆形,胞体肥大,胞浆丰富,且可见吞噬颗粒。随着细胞的增生及相互融合为单层,细胞的形态趋于一致。胞浆的色素颗粒及胞突消失,排列紧密呈类似上皮细胞的扁椭圆形或不规则形。胞体透亮,包膜清晰。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠小梁网采用组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠小梁网经NSE(神经元特异性烯醇化酶)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
小鼠铁蛋白试剂盒 小鼠铁蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠铁蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠铁蛋白试剂盒、小鼠铁蛋白试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
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小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human dermatan sulfate (DS) ELISA Kit 人皮肤素(DS)试剂盒
HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISAKit 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)试剂盒 96T/48T 进口分装
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钙粘蛋白23抗体
神经诱导胚胎发育相关蛋白Churchill抗体
HAVCR1重组食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein
MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受体(抗原)
PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CFL1 Protein Human 重组人 CFL1 / N-cofilin 蛋白
ENTPD5 Protein Mouse 重组小鼠 ENTPD5 蛋白
MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受体(抗原)
CFL1 Protein Human 重组人 CFL1 / N-cofilin 蛋白
HAVCR1重组食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein
ENTPD5 Protein Mouse 重组小鼠 ENTPD5 蛋白
PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein
大鼠小梁网细胞大鼠组蛋白H3(H3)试剂盒 ,英文名: H3 ELISA Kit
Nude mice of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 裸鼠环加氧酶2(COX-2)试剂盒
Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 小鼠胰岛素自身抗体(IAA)试剂盒 96T/48T 进口分装
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土壤氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量试剂盒20次
ELISAKitACA-IgA大鼠抗心0脂抗体IgA
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