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更新时间:2024-10-29
大鼠外周血白细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
外周血 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 圆形 | YS-01X7105 |
细胞简介:
大鼠外周血白分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞(Leukocyte),旧称白血球,血液中的一类细胞。根据白细胞的细胞质内有无特殊颗粒,可将其分为有粒白细胞和无粒白细胞。前者常简称为粒细胞,根据其特殊颗粒的染色特性,又分为中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞,白细胞也通常被称为免疫细胞。在显微镜下可以看到,血细胞中体积比较大、数量比较少,具有细胞核;其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠外周血白采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠外周血白经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人早期生长应答蛋白1(EGR1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit
人早期生长应答蛋白2(EGR2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human EGR2 (Early Growth Response Protein 2) ELISA Kit
人早期生长应答蛋白3(EGR3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit
人早期生长应答蛋白4(EGR4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human EGR4 (Early Growth Response Protein 4) ELISA Kit
豚鼠白介素1β(IL1β)试剂盒 ,英文名: IL1β ELISA Kit
Human cholyglycine (CG) ELISA Kit 人甘胆酸(CG)试剂盒
rabbitLeptin,LEPELISAKit 兔子瘦素(LEP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAELISAKit大鼠抗受体
线粒体复合物III蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit兔抗糖蛋白抗体(GP)试剂盒规格:96T/48T
丁酰基组蛋白H3重组兔单克隆抗体
染色质解旋酶DNA结合蛋白抗体
HA重组甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸环化酶激活肽 1-38(全蛋白)
CD97重组人 CD97 蛋白 (Fc 标签) Protein
ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重组人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白
ACVR2B Protein Human 重组人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 标签)
PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸环化酶激活肽 1-38(全蛋白)
ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重组人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白
HA重组甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVR2B Protein Human 重组人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 标签)
CD97重组人 CD97 蛋白 (Fc 标签) Protein
大鼠外周血白细胞人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA 试剂盒
Human ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanIerleukin10,IL-10试剂盒人白介素10(IL-10)试剂盒规格:96T/48T
组织抗坏血酸比色法定量试剂盒20次
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰岛淀粉样多肽(IAPP)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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