大鼠视网膜色素上皮细胞

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更新时间：2024-10-29

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产品名称：大鼠视网膜色素上皮细胞

组织来源：视网膜组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞简介：

大鼠视网膜色素上皮分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力强。视网膜色素上皮（RPE）位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道；主要是由单层色素上皮细胞所构成，排列十分规则。视网膜色素上皮参与循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形，细胞分为三部分，即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力，细胞死亡后不被替换，而是邻近的细胞向侧面滑动，以填补死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠视网膜色素上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠视网膜色素上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品：

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名称   方法   规格

人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒

humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7试剂盒人周期素依赖性激酶7(CDK-7)试剂盒规格：96T/48T

组织GSK3α激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)试剂盒规格：96T/48T

蛋白激酶抑制蛋白β抗体

起始识别复合蛋白亚基1抗体

AKT3重组小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 标签) Protein

甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)重组蛋白 Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)

CDH1重组人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 标签) Protein

IL9 Protein Human 重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

FCGR2B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白

FK506结合蛋白样蛋白(FKBPL)重组蛋白 Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)

IL9 Protein Human 重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

TFPI2重组小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 Protein

ERBB2 Protein Rat 重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白

FKBP7重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 Protein

大鼠视网膜色素上皮细胞人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 试剂盒

Human tumor specific aigen (TSA) ELISA Kit 人肿瘤特异性抗原(TSA)试剂盒

HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humaninsulinaoaibodies,IAA试剂盒人胰岛素自身抗体(IAA)试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-9)琥珀酰明胶法比色定量试剂盒20次

HumanLegionellaaibodyIgM，LPAb-IgMELISAKit人军团菌抗体IgM(LPAb-IgM)试剂盒规格：96T/48T

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作