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更新时间:2024-10-29
大鼠肾皮质上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肾组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7248 |
细胞简介:
大鼠肾皮质上皮分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肾皮质上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肾皮质上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
植物钙调素试剂盒 植物钙调素试剂盒 规格型号:96T/48T 植物钙调素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:植物钙调素试剂盒、植物钙调素试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
γ-谷酰转肽酶活性试剂盒 γ-谷酰转肽酶活性试剂盒 规格型号:96T/48T γ-谷酰转肽酶活性试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:γ-谷酰转肽酶活性试剂盒、γ-谷酰转肽酶活性试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
植物D3试剂盒 植物D3试剂盒 规格型号:96T/48T 植物D3试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:植物D3试剂盒、植物D3 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人1,3-二0酸甘油酸试剂盒 人1,3-二0酸甘油酸试剂盒 规格型号:96T/48T 人1,3-二0酸甘油酸试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人1,3-二0酸甘油酸试剂盒、人1,3-二0酸甘油酸试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
植物细胞分裂素(Cytokinin)试剂盒
Human ai liver kidney microsomal aibody (LKM) ELISA Kit 人抗肝肾微粒体抗体(LKM)试剂盒
Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 猪脑素/脑尿肽(BNP)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAFP-L2(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2)ELISAKit人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2
血液A含量荧光定量试剂盒20次
MouseThyroglobulin,TGELISAKit小鼠甲状腺球蛋白(TG)试剂盒
白细胞介素19抗体
麦芽糖结合蛋白抗体
PROM1重组大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 标签) Protein
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)
APP重组人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 标签) Protein
ADCYAP1R1 Protein Human 重组人 ADCYAP1R1 蛋白
CD200R4 Protein Mouse 重组小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)
ADCYAP1R1 Protein Human 重组人 ADCYAP1R1 蛋白
PROM1重组大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 标签) Protein
CD200R4 Protein Mouse 重组小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白
APP重组人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 标签) Protein
大鼠肾皮质上皮细胞人组织型纤维溶酶激活物(t-PA)试剂盒
Rat apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒
Humanai-toxoplasmaIgMaibody,ai-toxIgMELISAKit 人抗弓形体IgM抗体(ai-toxIgM)试剂盒 进口分装
HumanHeatShockProtein90,HSP-90试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒
组织副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR扩增试剂盒20次
HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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