服务热线
021-59989018
产品简介:
产品型号:
厂商性质:经销商
访问量:34
更新时间:2024-10-29
大鼠乳腺上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
乳腺组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7087 |
细胞简介:
大鼠乳腺上皮分离自乳腺组织;乳腺是复管泡状皮肤腺,主要由腺上皮细胞组成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,导管末梢发育成腺泡;近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞(MEC)有密切联系,体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织,乳腺由导管和腺泡组成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控,其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮分离自分娩后3-5天的乳腺组织,为贴壁生长型细胞,呈多角形、圆形以及短梭形;乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠乳腺上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠乳腺上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
溶酶体相关膜蛋白3 英文名称: Human Lysosomal Associated membrane protein 3 规格: 英文缩写: LAMP3
人乳酸脱氢酶 英文名称: Human Lactate Dehydrogenase 规格: 英文缩写: LDH
人 英文名称: lysozyme 规格: 英文缩写: LZM/LYS
甘露聚糖结合凝集素丝酸肽酶-2 英文名称: mannan-binding lectin associated serine proteases 规格: 英文缩写: MASP-2
豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)试剂盒 ,英文名: CGRP ELISA Kit
Human factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 人凋亡相关因子(FAS/CD95)试剂盒
MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬细胞移动抑制因子(MIF)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子9
细菌同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂20次
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)试剂盒规格:96T/48T
TATA盒结合蛋白相关因子TAF1C抗体
磷酸化内收蛋白gamma抗体
TNFSF12重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
TPH1重组人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
MERTK Protein Mouse 重组小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 标签)
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
IL1R2 Protein Human 重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
TNFSF12重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein
MERTK Protein Mouse 重组小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 标签)
TPH1重组人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
大鼠乳腺上皮细胞兔子白介素1(IL-1)ELISA 试剂盒
Human von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒
HumanBlockingaibody,BAELISAKit 人封闭抗体(BA)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humaneyemuscleaibody,EMAb试剂盒人抗眼肌抗体(EMAb)试剂盒规格:96T/48T
组织TIE2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
humanoncostatinMreceptor,OSMRELISAKit人制瘤素M受体(OSMR)试剂盒规格:96T/48T