大鼠胚胎干细胞

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更新时间：2024-10-29

大鼠胚胎干细胞

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细胞简介：

大鼠胚胎干分离自囊胚胚胎组织；胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞）是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。进一步说，胚胎干细胞（ES细胞）是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构，细胞核大，有一个或几个核仁，胞核中多为常染色质，胞质胞浆少，结构简单。体外培养时，细胞排列紧密，呈集落状生长。用碱性磷酸酶染色，ES细胞呈棕红色，而周围的成纤维细胞呈淡黄色。细胞克隆和周围存在明显界限，形成的克隆细胞彼此界限不清，细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样，多数呈岛状或巢状。小鼠ES细胞的直径7 微米～18 微米，猪、牛、羊ES细胞的颜色较深，直径12 微米～18 微米。胚胎干细胞与普通细胞有显著差别，有其特定的生长特性和特定的标志，例如碱性磷酸酶活性非常高，带有胚胎阶段特异性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人类胚胎干细胞还带有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等标志，这些特性和标志均可以用于对胚胎干细胞进行鉴定，除此之外，胚胎干细胞还可以在体外传代，并保持正常核型。在体外培养体系中加入分化抑制剂如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层（MEF）上培养时，胚胎干细胞都能呈克隆性增殖，长期保持核型正常和稳定，冻存解冻也不影响不分化的特性。另外，胚胎干细胞还表现岀高水平端粒酶活性，目前证明端粒酶与细胞衰老密切相关，多数成熟细胞的端粒酶活性都很低。这些都是胚胎干细胞与成熟细胞不同的重要特点，也可能是其复制生命期限远比体细胞长的原因。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠胚胎干采用分离囊胚组织，去除胚胎透明带、使用特制专用培养基筛选培养，消化传代纯化制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠胚胎干经Oct-4免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 明胶（0.1%）

培养基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 短梭形、多角形

传代特性 可传5-8代左右

消化液 0.025%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代及冻存：

原代细胞的培养方法一般有以下4种：

　　① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

公司正在出售的产品：

小鼠纤维连接蛋白   英文名称：   Fibronectin   规格：      英文缩写：   FN

FMS样酪酸激酶   英文名称：   Fms-related tyrosine kinase-3   规格：      英文缩写：   Flt3

小鼠Flt3配体   英文名称：   Fms-related tyrosine kinase-3 Ligand   规格：      英文缩写：   Flt3 Ligand

小鼠纤维连接蛋白   英文名称：    fibronecti   规格：      英文缩写：   FN

小鼠胃泌酸调节素(OXM)试剂盒 96T/48T

Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)试剂盒

Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人碱性0酸酶(ALP)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin1,IL-1试剂盒鸡白介素1(IL-1)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞ERK蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)试剂盒规格：96T/48T

PE标记人CD18单克隆抗体

酪激酶A/B/C重组兔单克隆抗体

PTPN11重组小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

泛素(Ub)重组蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

PRKAR1A重组人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

EFNA5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

转铁蛋白受体(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)

CDK16 Protein Human 重组人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 标签)

CD6重组小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein

PRLR Protein Rat 重组大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein

大鼠胚胎干细胞兔子内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 试剂盒

People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)试剂盒E

Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受体(poly-IgR)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humandynorphin,Dyn试剂盒人强啡肽(Dyn)试剂盒规格：96T/48T

组织P38a激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)试剂盒规格：96T/48T

原代细胞的培养条件：

　　一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

　　1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；

　　2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；

　　3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；

　　4、 胎牛血清浓度为10%-80%

　　5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；

　　6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；

　　7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；

　　8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。

　　二、悬浮细胞培养

　　1、原代培养时要尽量去除红细胞；

　　2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；

　　3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；

　　4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；

　　5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；

　　6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。