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更新时间:2024-10-29
大鼠膀胱移行上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
膀胱组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7229 |
细胞简介:
大鼠膀胱上皮分离自膀胱组织;膀胱是一个储尿器官,在哺乳类动物,它是由平滑肌组成的一个囊形结构,位于骨盆内,其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三层组织组成,由内向外为黏膜层、肌层和外膜。肌层由平滑肌纤维构成,称为逼尿肌,逼尿肌收缩,可使膀胱内压升高,压迫尿液由尿道排出。在膀胱与尿道交界处有较厚的环形肌,形成尿道内括约肌。在括约肌收缩能关闭尿道内口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分为三层:即浆膜层(蜂窝脂肪组织)、肌肉层(逼尿肌、膀胱三角区肌)和黏膜层(极薄的一层移行上皮组织)。其主要作用有:①组成过滤屏障内壁的重要部分;②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子;③受损后影响系膜细胞和上皮细胞,进而影响肾脏病变。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠膀胱移行上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠膀胱移行上皮经Cytokeratin-AE1/AE3免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
中文名称 方法 规格
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit ELISA.
人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit ELISA.
人单胺氧化酶(MAO)ELISAKit ELISA.
猪白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA 试剂盒
Human ai Ku aibody (ai-Ku-Ab) ELISA Kit 人抗Ku抗体(ai-Ku-Ab)试剂盒
PorcineCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit 猪Ⅲ型胶原(ColⅢ)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAlb白蛋白(夹心法一步法)
血液型纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)活性比色法定量试剂盒20次
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)试剂盒
Pacific Blue标记小鼠NK1.1单克隆抗体
跨膜蛋白109抗体
IL13RA1重组小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原
CAT重组人 CAT / Catalase 蛋白 (His 标签) Protein
AKR1A1 Protein Human 重组人 AKR1A1 蛋白 (His 标签)
GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 标签)
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator 0.5mgCFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纤维化跨膜转运调节因子抗原
AKR1A1 Protein Human 重组人 AKR1A1 蛋白 (His 标签)
IL13RA1重组小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白 (His & Fc 标签)
CAT重组人 CAT / Catalase 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠膀胱移行上皮细胞兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 试剂盒
Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠血管生成素4(ANG-4)试剂盒
Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲状腺球蛋白(TG)试剂盒 进口分装
HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA试剂盒人细胞毒素相关蛋白A(CagA)试剂盒
组织IKKβ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。