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基础信息Product information
产品名称:

大鼠精原干细胞

产品简介:

大鼠精原干细胞公司正在出售的产品:结合球蛋白β抗体 磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶2抗体 自然杀伤细胞亲环素相关蛋白抗体 大鼠卵巢成纤维细胞 小鼠食管平滑肌细胞 人弥漫大B淋巴瘤细胞-荧光素酶标记;HBL-1-LUC-PURO MC/CAR (人外周血淋巴细胞)

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:35

更新时间:2024-10-29

产品特性Product characteristics

大鼠精原干细胞

大鼠精原干细胞

商品属性:

组织来源

产品规格

细胞形态

货号

睾丸组织

5×105cells/T25细胞培养瓶

球形

YS-01X7523

细胞简介:

大鼠精原干分离自睾丸组织;精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞,是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究,发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染,异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内,发生时一个受高度调控和持续的过程,精原干细胞(SSCs)一方面进行自我更新维持干细胞数量,另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处,是哺乳动物发生的最原始细胞,也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立,在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,是哺乳动物体内能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。

方法简介:

公司实验室分离的大鼠精原干采用先机械吹打、后消化,结合Percoll密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:

公司实验室分离的大鼠精原干经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 球形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

大鼠精原干细胞

细胞传代及冻存:

细胞传代步骤细胞冻存步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种:

  ① 组织块培养法

  组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

  ② 消化培养法

  ③ 悬浮细胞培养法

  对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

  ④器官培养

  器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。

大鼠精原干细胞


公司正在出售的产品:

猪Ⅲ型胶原(Col)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪Ⅰ型前胶原羧基端肽(PCP)试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物玉米素核苷(ZR)试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物玉米素(Z)试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪促生长激素释放激素(GHRH)ELISA 试剂盒

Human macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 人巨噬细胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)试剂盒

PorcineDexamethasone,DexELISAKit (Dex)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAlpha1Beta-GP(HumanAlpha1Betaglycoprotein)ELISAKit人α1β糖蛋白

血液0酸二酯酶3(PDE3)活性荧光定量试剂盒10

MouseαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)试剂盒

FRYL蛋白抗体

环指蛋白111抗体

IL8重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 标签) Protein

(F10)重组蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

EFNA4重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

ALOX5AP Protein Human 重组人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 标签)

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

(F10)重组蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

ALOX5AP Protein Human 重组人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 标签)

IL8重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 标签) Protein

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

EFNA4重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

大鼠精原干细胞小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)试剂盒

Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒

HumahromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)试剂盒 进口分装

HumanCollagenaseTypeII试剂盒人胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒

组织ABL1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20

HumaeceptorfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRELISAKitGFc段受体Ⅲ(FcγR/CD16)试剂盒

原代细胞的培养条件:

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;

  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;

  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%

  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;

  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;

  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;

  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;

  3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;

  4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。


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