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更新时间:2024-10-29
大鼠脊髓神经元细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脊髓组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 神经元细胞样 | YS-01X7451 |
细胞简介:
大鼠脊髓神经元分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由神经细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成;脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路,也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节,31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元,即神经细胞,其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体,内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示,在光镜下是灰蓝色斑块状,称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起,能在神经元之间传递电冲动,突起的大小和形态各不相同,很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞,神经元含量少,分离纯化难度大,且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞,不能分裂增殖,培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形,体积小,透亮,无突起。培养2-3d,可见胞体增大,突起增多延长;培养6-7d,细胞体大饱满,突起明显增加延长并交织成网,光晕明显,立体感强。培养20d后,死亡细胞明显增加,细胞出现内空泡,突起粗细不均,甚至脱壁,发生细胞崩解。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠脊髓神经元采用胶原酶&联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠脊髓神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人组织多肽抗原(TPA)试剂盒 96T/48T
人组织蛋白去乙酰化酶(HD)试剂盒 96T/48T
人组织蛋白酶抗体(CathAb)试剂盒 96T/48T
人组织蛋白酶S(cath-S)试剂盒 96T/48T
豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)试剂盒 ,英文名: MMP-9 ELISA Kit
Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)试剂盒
MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干扰素(IFN-γ)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人碱性成纤维细胞生长因子6
细菌乳酸脱氢酶(LDH)总活性酶动力比色法定量试剂盒20次
RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)试剂盒规格:96T/48T
EPB41L5蛋白抗体
过氧化氢酶重组鼠单克隆抗体
MDGA2重组小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein
BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐药相关蛋白(抗原)
LRP10重组人 LRP10 蛋白 Protein
IL1RL1 Protein Human 重组人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 标签)
CD40LG Protein Rat 重组大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)
BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein 0.5mgBCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐药相关蛋白(抗原)
IL1RL1 Protein Human 重组人 IL1RL1 / ST2 蛋白 (isoform a, His 标签)
MDGA2重组小鼠 MDGA2 / MAMDC1 蛋白 Protein
CD40LG Protein Rat 重组大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)
LRP10重组人 LRP10 蛋白 Protein
大鼠脊髓神经元细胞小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 试剂盒
Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人3(VD3)试剂盒
HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗体(AOAb)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humancholecystokinin,CCK试剂盒人胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒规格:96T/48T
紫外可见光分析20样本
HumanSecretinELISAKit人促胰液素/胰泌素(Secretin)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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