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更新时间:2024-10-29
大鼠骨髓来源巨噬细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨髓 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 巨噬细胞样 | YS-01X7442 |
细胞简介:
大鼠骨髓来源巨噬分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠骨髓来源巨噬采用分离骨髓单个核细胞经细胞因子诱导分化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠骨髓来源巨噬经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 巨噬细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 试剂盒因(12mM)
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
植物E试剂盒 植物E试剂盒 规格型号:96T/48T 植物E试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:植物E试剂盒、植物E 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒 豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒、豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人chemerin试剂盒 人chemerin试剂盒 规格型号:96T/48T 人chemerin试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人chemerin试剂盒、人chemerin 试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人12羟二十烷四烯酸试剂盒 人12羟二十烷四烯酸试剂盒 规格型号:96T/48T 人12羟二十烷四烯酸试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人12羟二十烷四烯酸试剂盒、人12羟二十烷四烯酸试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
猪Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 试剂盒
Human ai spindle aibody (MSA) ELISA Kit 人抗纺锤体抗体(MSA)试剂盒
Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAGEsELISAKit大鼠晚期糖基化终末产物
血液肾素(renin)荧光定量试剂盒20次
MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)试剂盒
9号染色体开放阅读框71抗体
端粒保护蛋白1抗体
HA重组甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein
PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配对盒基因8抗原
TRIB3重组人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 标签) Protein
AFM Protein Human 重组人 AFM / Afamin 蛋白 (His 标签)
BMPR1A Protein Human 重组人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 标签)
PAX8(Paired box gene 8 0.5mgPAX8(Paired box gene 8) 配对盒基因8抗原
AFM Protein Human 重组人 AFM / Afamin 蛋白 (His 标签)
HA重组甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein
BMPR1A Protein Human 重组人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 蛋白 (His & Fc 标签)
TRIB3重组人 TRIB3 / TRB3 蛋白 (GST 标签) Protein
大鼠骨髓来源巨噬细胞小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISA 试剂盒
Rat ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)试剂盒
HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39ELISAKit 人软骨糖蛋白39(HCgp-39)试剂盒 进口分装
HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1Ab试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)试剂盒
植物谷氨酰半胱合成酶(glamylsysteinesyhetase)活性比色法定量试剂盒20次
Humanβ-glucuronidase,βGDELISAKit人β葡萄糖酸苷酶(βGD)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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