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更新时间:2024-10-29
大鼠睾丸支持细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
睾丸组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7494 |
细胞简介:
大鼠睾丸支持分离自睾丸;睾丸支持细胞又称Sertoli细胞,在体内呈不规则的高锥体形,细胞基部附着在基膜上,顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架,为其提供必需的营养物质,能合成与分泌雄激素结合蛋白,为其提供高浓度的雄激素环境等,还具有构成血-睾屏障,形成睾丸内微环境,调节发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞,能分泌多种生长因子和免疫抑制因子,不仅可为提供营养支持和免疫保护,也能对其他细胞,如胰岛和神经细胞提供营养支持,而且当其与胰岛或神经细胞共移植时,也能够为这些细胞提供免疫保护,提高植活率。因此,睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值,而且在发生等领域有重要意义。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠睾丸支持采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠睾丸支持经Fas-L免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
植物血球凝集素M 10mg
PHA-M 25mg
吩嗪甲酯 1g
PhenMethosulfate 5g
猪B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 试剂盒
Human ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 人抗单核细胞抗体(AMA)试剂盒
Porcinetelomerase,TEELISAKit 猪端粒酶(TE)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAGPA/PCA(Humanai-gasicparietalcellaibody)ELISAKit人抗胃壁细胞抗体
血液人类巨细胞病毒蛋白酶(HCMVPROTEASE)活性荧光淬灭法定量试剂盒20次
Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)试剂盒
1号染色体开放阅读框130抗体
单羧酸转运蛋白5抗体
IL13RA1重组大鼠 IL13RA1 蛋白 Protein
Ghrelin 28 脑肠肽28 0.5mgGhrelin 28 脑肠肽28
FCGR2B重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein
AGER Protein Human 重组人 AGER / RAGE 蛋白 (His 标签)
CXADR Protein Mouse 重组小鼠 CXADR 蛋白 (His 标签)
Ghrelin 28 脑肠肽28 0.5mgGhrelin 28 脑肠肽28
AGER Protein Human 重组人 AGER / RAGE 蛋白 (His 标签)
IL13RA1重组大鼠 IL13RA1 蛋白 Protein
CXADR Protein Mouse 重组小鼠 CXADR 蛋白 (His 标签)
FCGR2B重组人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein
大鼠睾丸支持细胞小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 试剂盒
Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受体抗体试剂盒
Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎儿血红蛋白(HBF)试剂盒 进口分装
Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2试剂盒人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)试剂盒
植物氨含量荧光定量试剂盒20次
Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羟基雌同1(16-αOHE-1)试剂盒