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更新时间:2024-10-28
大鼠肺小动脉平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肺小动脉组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7742 |
细胞简介:
大鼠肺小动脉平滑肌分离自肺小动脉组织;小动脉(smallartery),管径在0.3~1mm之间,小动脉包括粗细不等的几级分支,也属肌性动脉。较大的小动脉,内膜有明显的内弹性膜,中膜有几层平滑肌,外膜厚度与中膜相近,一般没有外弹性膜。小动脉是决定周围循环阻力大小的主要因素,也是调节微循环灌注量的“总开关"。典型的小动脉,其管壁的厚度与管径相比约为1∶2。中膜的肌层相对比其他动脉为厚,当平滑肌在神经支配下强力收缩时,其管腔可以闭塞,而使血液不能流入它所分布的毛细血管内,从而增加了周围血液循环的阻力。如果有许多小动脉同时收缩,可使血压显著上升。反之,当小动脉的平滑肌舒张时,则可使大量的血液流入毛细血管,外周阻力明显下降,血压降低。终末小动脉(terminal arteri-ole)的口径为20~30μm;后小动脉(metar-teriole),又称毛细血管前小动脉(precapil-lary arteriole)的口径为12~15μm。管壁内均有较稀疏的平滑肌,在毛细血管前小动脉分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛细血管前括约肌(precapillary sphinc-ter),其收缩或舒张,可调节真毛细血管的血流量,是调节微循环灌注量的“分开关"。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次;
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
瑞氏-姬姆萨复合染液 Vascular permeability test solion
姬姆萨染液 Peroxidase staining
巴氏染液(脱落细胞染色) Name
快速H-E组织细胞及脱落细胞染液 Phosphate buffer
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)试剂盒E
Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK试剂盒人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)试剂盒规格:96T/48T
组织EPHB4激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanProgesterone,PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)试剂盒规格:96T/48T
转录激活蛋白CRSP9抗体
白细胞介素增强子结合因子2抗体
ACE2重组食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛素
TLK1重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein
IL18 Protein Human 重组人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 标签)
IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛素
IL18 Protein Human 重组人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 标签)
ACE2重组食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
IL36B Protein Mouse 重组小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
TLK1重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein
大鼠肺小动脉平滑肌细胞小鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA 试剂盒
Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 轻链kappa抗体(κ-IgLC)试剂盒
HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人类白细胞抗原B27(HLA-B27)试剂盒 96T/48T 进口分装
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP试剂盒鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母蛋白巯基/结合巯基含量比色法定量试剂盒20次
MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠补体片断3a(C3a)试剂盒规格:96T/48T
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