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更新时间:2024-10-27
大鼠外周血单核细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
外周血 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 不规则细胞 | YS-01X7558 |
细胞简介:
大鼠外周血单核分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。单核细胞起源于骨髓中的造血干细胞,并在骨髓中发育。当它们从骨髓进入血液时仍然是尚未成熟的细胞。与其他血细胞比较,单核细胞内含有更多的非特异性脂酶,并且具有更强的吞噬作用。单核细胞在血液中停留2-3天后迁移到周围组织中,细胞体积继续增大,直径可达50-80μm,细胞内所含的溶酶体颗粒和线粒体的数目也增多,成为成熟的细胞。固定在组织中的单核细胞称为组织巨噬细胞,它们经常大量存在于淋巴结、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的单核细胞和组织巨噬细胞能生成并释放多种细胞毒、干扰素和白细胞介素,参与机体防卫机制,还产生一些能促进内皮细胞和平滑肌细胞生长的因子。在炎症周围单核细胞能进行细胞分裂,并包围异物。
方法简介:
见说明
质量检测:
本公司生产的大鼠外周血单核采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;经CD14免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠纤连蛋白检测试剂盒 小鼠纤连蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠纤连蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠纤连蛋白试剂盒、小鼠纤连蛋白检测试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胃肠癌标志物检测试剂盒 小鼠胃肠癌标志物试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胃肠癌标志物试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胃肠癌标志物试剂盒、小鼠胃肠癌标志物检测试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠lisa试剂盒 小鼠试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠试剂盒、小鼠lisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠网膜素检测试剂盒 小鼠网膜素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠网膜素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠网膜素试剂盒、小鼠网膜素检测试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胃动素(MTL)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human phospholipase C (PLC) ELISA Kit 人0酯酶C(PLC)检测试剂盒
HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 人孤腓肽(OFQ/N)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenIerleukin1β,IL-1β检测试剂盒鸡白介素1β(IL-1β)检测试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞GSK-3BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit小鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)检测试剂盒规格:96T/48T
液泡蛋白分选蛋白25抗体
PE标记小鼠CD152单克隆抗体
TCN2重组人 TCN2 蛋白 Protein
血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
HA重组甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CDK2 Protein Human 重组人 CDK2 / p33 蛋白
RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重组人类呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白
血小板衍生生长因子A(PDGFA)重组蛋白 Recombinant Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)
CDK2 Protein Human 重组人 CDK2 / p33 蛋白
TCN2重组人 TCN2 蛋白 Protein
RSV-F Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重组人类呼吸道合胞病毒 hRSV Fusion protein / RSV-F (Strain RSS-2) 蛋白
HA重组甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
大鼠外周血单核细胞猪超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 试剂盒
People gathered protein (Agrin) ELISA Kit 人聚集蛋白(Agrin)检测试剂盒
Porcinesodium-glucosecoanspoer1,SGLT1ELISAKit 猪-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforALP(Humanalkalinephosphatase)ELISAKit人碱性0酸酶
血液卵0脂乙酰转移酶(LCAT)活性比色法定量检测试剂盒20次
Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit小鼠α1微球蛋白(α1-MG)检测试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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