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更新时间:2024-10-27
大鼠肺大静脉平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肺静脉组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 不规则细胞 | YS-01X7042 |
细胞简介:
大鼠肺大静脉平滑肌分离自肺大静脉组织;肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中,把动脉血由肺送回心脏的静脉,是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对,共4条,两条连接右肺,两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接,而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压,是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下,肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点,肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力,要维持肺循环的低压、低阻的状态,必须保证整个肺循环系统的畅通无阻,血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉,再入左心室,经过左心室收缩进入体循环,才能避免肺动脉内压力升高。肺大静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。该细胞参与血管壁炎症反应,保持静脉管腔的通畅,还是多数动脉疾病的靶细胞。
方法简介:
见说明
质量检测:
本公司生产的大鼠肺大静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;经alpha-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
DMEM[H]、FBS、平滑肌细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人原钙黏素1(PCDH1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit
人原钙黏素β2(PCDHβ2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PCDHβ2 (Protocadherin Beta 2) ELISA Kit
人原纤蛋白1(FBN1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit
人原纤蛋白2(FBN2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)检测试剂盒 ,英文名: IFN-γ ELISA Kit
Human mast cell yptase (MCT) ELISA Kit 人肥大细胞类(MCT)检测试剂盒
rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 兔子促甲状腺素(TSH)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBeta2-GP1AbIgG(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgG)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgG
细菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量检测试剂盒20次
RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit兔内皮型合成酶(eNOS)检测试剂盒规格:96T/48T
嗅觉受体家族5亚基1抗体
Pacific Blue标记人CD56 (NCAM)单克隆抗体
IL20RA重组狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 标签) Protein
MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原
COL2A1重组人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 标签) Protein
KCNIP3 Protein Human 重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白
MAP2K1 Protein Mouse 重组小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白
MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human、ret、mouse MYOZ抗原
KCNIP3 Protein Human 重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白
IL20RA重组狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 标签) Protein
MAP2K1 Protein Mouse 重组小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白
COL2A1重组人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 标签) Protein
大鼠肺大静脉平滑肌细胞猪透明质酸(HA)ELISA 试剂盒
Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)检测试剂盒
GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforANG-R-Tie1ELISAKit大鼠血管生成素受体Tie1
血液超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒20次
PorcineFollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit猪促卵泡素(FSH)检测试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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