γ干扰素elisa试剂盒是指用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。干扰素试剂盒使用采用进口抗体包被,以确保实验的重复性与可靠性。干扰素试剂盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体。适用于血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。
γ干扰素elisa试剂盒检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2、酶标板置4℃,包被过夜。
3、洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4、阴性对照孔每孔加入PBS50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl
5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6、洗板,同(4)。
7、每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9、洗板,同(4)。
10、每孔加TMB显色液100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11、每孔加100μl2mol/LH2SO4终止反应。
12、分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,醉终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13、数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。