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活化素Aelisa试剂盒的检测步骤如下

日期:2023-07-27浏览:350次

  活化素Aelisa试剂盒检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  活化素Aelisa试剂盒的检测步骤:
  1、准备工作:将试剂、标准品和样品等达到室温,并确保所有试剂和设备准备就绪。
  2、样品处理:将待测样品和标准品加入预先涂有捕获抗体的酶标板孔中,使活化素与捕获抗体结合。
  3、洗涤:通过洗涤步骤去除未结合的物质,以减少非特异性信号。
  4、检测抗体结合:加入标记有酶的检测抗体,使其与已结合的活化素形成复合物。
  5、再次洗涤:去除未结合的检测抗体。
  6、显色反应:加入显色底物,使酶催化底物反应产生可测量的颜色。
  7、反应终止:通过加入反应终止剂,停止显色反应。
  8、测量信号:使用光度计测量吸光度,根据标准曲线确定样品中活化素的浓度。
  活化素Aelisa试剂盒的原理基于活化素与特异性抗体的结合,并利用酶的催化作用产生可测量的信号。通过比较待测样品的信号与标准曲线上的标准品信号,可以确定样品中活化素的浓度。具体的操作步骤和原理可能因不同的试剂盒品牌和制造商而有所不同,因此,在使用活化素Aelisa试剂盒之前,建议仔细阅读试剂盒的说明书和制造商提供的指南,并遵循其建议和要求。

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