​生发中心激酶样激酶抗体技术的实验步骤

生发中心激酶样激酶抗体技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

抗体制备过程：

1.材料与试剂

a．提取的动物 Ig

b．弗氏佐剂和弗氏不佐剂

d．实验动物 兔

e．其它材料及试剂

2、选择实验活体。

3、进行动物免疫实验。

4、试取血样进行测试，查看免疫效果。

5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。

6、纯化出抗体。

7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）