浅看多态性试剂盒(PCR-RLFP)的使用方法及特点

　　多态性试剂盒(PCR-RLFP)引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

　　多态性试剂盒(PCR-RLFP)的使用方法：

　　一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）

　　1、注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA段作为阳性对照。

　　2、标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。

　　3、用带芯枪头分别加入45μL荧光PCR模板稀释液（用带芯枪头，下同）。

　　4、在7号管中加入5μL1×10E8拷贝/μL的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

　　5、换枪头，在6号管中加入5μL1×10E7拷贝/μL的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

　　6、换枪头，在5号管中加入5μL1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

　　7、重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

　　多态性试剂盒(PCR-RLFP)具有下列特点：

　　1、根据指标的保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。

　　2、灵敏度比常规PCR高2-3个数量级，可以达到几百拷贝/反应。

　　3、即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。

　　4、一管式荧光定量PCR检测，避免后续污染。

　　5、本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。

　　6、本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。