倍赞氏金蝇探针法荧光定量PCR检测试剂盒应用案例

倍赞氏金蝇探针法荧光定量PCR检测试剂盒应用案例：

样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DN段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分。

乳腺癌增强蛋白2抗体
α1微球蛋白抗体
α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体
腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体
AMPK的相关蛋白激酶5抗体
致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体
腺苷脱氨酶抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体
ATRNL1蛋白抗体
AFP4a蛋白抗体
铁蛋白Fe65样蛋白1抗体
铁蛋白Fe65样蛋白2抗体
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体
早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
ASH1L蛋白抗体
α2C-AR肾上腺素能受体抗体
中心体蛋白AZI1抗体
α蛋白激酶3抗体
表皮型脂氧合酶3抗体
锚蛋白重复域28抗体
淋巴细胞相关AF4样蛋白抗体
锚蛋白重复结构域蛋白12抗体
锚蛋白重复结构域蛋白13A抗体
锚蛋白重复结构域蛋白9抗体
锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体